酵母のガラクトース応答機構

酵母中的半乳糖反应机制

• 批准号: 06261236
• 负责人: 深沢 俊夫
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Keio University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06261236/
• 关键词: 酵母; ガラクトース; 転写誘導

増殖中の酵母培養液にガラクトースを加えると、この糖を分解する酵素系の構造遺伝子群(以下、GAL遺伝子)の転写が一斉に始まる。この転写誘導には、各構造遺伝子の上流にあるエンハンサー(UASG)に結合するアクチベータ-Gal4タンパク(Gal4p)およびこれに結合してその働きを抑えるGal80タンパク(Gal80p)の他に、Gal3タンパク(Gal3p)が必須である。最近の我々の実験結果は、転写誘導すなわちGal4pの活性化が細胞内のGal80pとGal3pの量的バランスによって行われていることを示唆した。すなわち、Gal3pを過剰発現させるとGAL遺伝子は構成的に発現するが、Gal80pを同時に過剰発現すると構成的発現は抑えられることが判った。このことはまた、Gal80pとGal3pが細胞内で相互作用することを強く示唆する。そこで、インフルエンザウイルスのHAエピトープをGal3pのN‐末端に連結した融合タンパクを野性型酵母内で過剰発現させ、その粗抽出液からHA抗体を用いてHA‐Gal3pを沈降させた。この酵母をガラクトース存在下で増殖させた時にはGal80pが共沈することが判った。ところが、この酵母をグルコース存在下で増殖させたときにはGal80pの共沈は極めて僅かにしか見られなかった。そこで、HA‐GAL3遺伝子にヒドロキシアミンを用いてミスセンス変異を導入し、そのうちでウエスタン解析で正常な大きさのHA‐Gal3pをつくるものについてGal80pとの結合能を調べた。その結果、調べられたすべて(3株)はGal80p結合能を失っていた。このことは、Gal3pとGal80pとの相互作用が転写誘導に重要な役割を果たしていることを強く示唆している。

In the process of breeding, the yeast culture solution was added to the yeast culture solution, the sugar was decomposed, the enzyme subgroup (below, GAL) was made, and the first step was written. In this system, you need to write a guide, and each organization makes a combination of the high-level information system (UASG) and the system (Gal4p) to suppress the Gal80 response (Gal80p) and the Gal3 response (Gal3p). Recently, we have reviewed the results and wrote that the Gal4p is activating the intracellular level of Gal80p Gal3p. This is an indication of instigation. In the meantime, Gal3p filters and Gal80p subsets that are made up of existing GAL subsets are subject to failure and suppression tests. The intracellular interactions of Gal80p Gal3p cells are strongly indicative of instigation. The fusion protein of wild type yeast was detected in the wild type yeast, and the crude extract was detected. The HA antibody was detected in the crude extract, and the HA antibody was detected in the crude extract. The HA-Gal3p was used to precipitate the yeast. In the presence of low-temperature yeast, there is a co-precipitation of Gal80p in order to determine the accuracy of the assay. In the presence of yeast and yeast, the co-deposition of yeast, yeast, Gal80p, yeast, yeast and yeast. In this case, you can use the following information: HA-GAL3, HA-Gal3p, Gal80p, Gal80p, and so on. The results showed that the combination of 3 strains of Gal80p could cause loss of DNA. The interaction between Gal3p and Gal80p is very important. It is important to cut the fruit in service.