真核生物におけるS期開始に必須なNDA1およびNDA4遺伝子の解析

真核生物 S 期起始必需的 NDA1 和 NDA4 基因分析

• 批准号: 06262224
• 负责人: 三宅 早苗
• 金额: $ 0.83万
• 依托单位: Toho University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06262224/
• 关键词: DNA複製; MCM; nda; 分裂酵母; アフリカツメガエル

研究代表者らは、分裂酵母からDNA複製に関与するnda1及びnda4遺伝子を単離している。nda遺伝子の機能解析のため、nda1及びnda4変異株のサプレッサー変異株の単離を行ない、13株のnda4サプレッサー変異株を得た。そのうちの1株はnda4遺伝子そのものに、12株はnda4遺伝子以外の同一遺伝子座に変異を生じていた。サプレッサー変異株は高温感受性であり、高温で培養すると1核で細胞が伸長するという表現型を示す。サプレッサー遺伝子を単離し塩基配列を決定したところ、サプレッサー遺伝子は約70kDの蛋白質をコードし、そのアミノ酸配列は既知の蛋白質と相同性がなく、新たに見つかった蛋白質であることが示された。遺伝子破壊実験の結果、サプレッサー遺伝子は生育に必須であり、遺伝子破壊株は1、2回細胞分裂を行なった後、増殖を停止することが明らかとなった。また、PCR法により、アフリカツメガエルのnda相同遺伝子の単離を行ない、2種の、ORFほぼ全域を含むcDNAを単離した。その塩基配列を決定した結果、そこから予想されるアミノ酸配列は同一アミノ酸レベルにおいて、1つはヒトBM28遺伝子産物と78%、分裂酵母nda1遺伝子産物と48%の、1つは分裂酵母nda4遺伝子産物と48%の相同性を示した。前者については抗体を作製し、ウエスタンブロット法を行った結果、120kDの大きさの蛋白質が検出され、これが遺伝子産物と思われた。

Study representatives are involved in DNA replication in yeast, fission yeast, and nda1 and nda4 genes. The function analysis of nda gene is as follows: nda 1, nda 4, nda4, nda 6, nda 7, nda 8, nda 9, nda 9, nda 9 1 strain of NDA 4 strain The phenotype of the mutant is shown by its sensitivity to high temperature and its ability to grow under high temperature. The protein of 70kD is determined by the sequence of the protein of The results of seed germination and seed reproduction are necessary, and the seed germination and seed reproduction are stopped after cell division of 1 or 2 cycles. PCR method is used to detect and detect cDNA fragments of the same gene, two species, and the whole ORF region. The results showed that the nucleotide alignment of the two enzymes was identical, with 78% identity of the BM28 gene product, 48% identity of the NDA1 gene product, and 48% identity of the NDA4 gene product. The former contains antibodies, the latter contains proteins of 120kD, and the latter contains protein products.