GTP結合蛋白質の翻訳後修飾による機能発現制御メカニズムに関する研究

GTP结合蛋白翻译后修饰调控功能表达的机制研究

• 批准号: 06264215
• 负责人: 藤山 秋佐夫
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06264215/
• 关键词: 分裂酵母; ras; Gタンパク質; ファルネシル化; イソプレニル化

本研究は、GTP結合タンパク質の機能発現・機能制御に重要な役割を果たしている翻訳後修飾の、機能発現・機能制御への関わりを明かにすることを目的する。本年度の研究により、2つの新しい知見が得られた。(1) まず、分裂酵母(Schizosaccaromyces pombe)ras1タンパク質につき、翻訳後修飾とin vitroにおける反応性に検討を加えた。その結果、予想通りras1タンパク質のイソプレニル化とパルミチル化を確認した。また、生化学レベルでの解析を行い、ras1タンパク質は、GTPいがいにATP共結合すること、また、その結合速度はGDPのそれに匹敵するものであることを明らかにした。In vivoで、実際にATPがras1と結合しているか否か、また、ATPase活性を持つかどうかの検討は次年度に行う予定である。GTPおよびGDPに対する、解離速度、解離定数をそれぞれ求め、GTPaseの反応速度も測定した。これらのras1に関する生化学的諸定数を既知のrasタンパク質に対するものと比較した結果、これまで分裂酵母ras1タンパク質は、分子量、機能から高等動物のrasタンパク質に近いといわれてきたが、生化学的に見る限り出芽酵母RAS2タンパク質との類似性がむしろ高いことがわかった。(2) 分裂酵母からras1タンパク質のファルネシル化を行う酵素の部分精製を行った。その結果、この酵素は未知のタンパク質と複合体を形成し、それが安定化に寄与していること、また、基質タンパク質に対して異なる反応特異性を示す酵素群が存在することを明らかにした。速度論的解析を行った結果、他の生物種ではファルネシル化酵素ではゲラニルゲラニル化酵素が認識するC末端配列を分裂酵母の酵素は基質とすることが明らかになった。

In this study, it is important to realize the functional realization and functional control of GTP combined with the quality of GTP. The function is modified after the translation, and the function is controlled by the function control. This year's research is a new one, and the new one is a new one. (1) まず, fission yeast (Schizosaccaromyces pombe) ras1 タンパク性につき, in vitro modification after translation とin vitro におけるreflexive に検を加えた.そのResults, I figured out the りras1タンパク性のイソプレニル化とパルミチル化をconfirmationした.また, biochemistry レベルでのanalytic を行い, ras1 タンパクquality は, GTP いがいにATP co-binding The combined speed of すること, また, and そのGDPのそれに rivals するものであることを明らかにした. In vivo で、実记にATPがras1とcombination しているか不か、また、ATPase activity をhold つかどうかの検ask は に行う下注である. GTPおよびGDPに対する, dissociation speed, dissociation constant number をそれぞれめ, GTPase のreaction speed もdetermination した.これらのras1に关するAll definite numbers of biochemistryをknownのrasタンパク性に対するものと comparison result, これまで fission yeast ras1タンパク quality, molecular weight, machineからHigher animal のrasタンパク性にNearly いといわれてきたが、Biochemistry に见るlimited budding yeast RAS2タンパク性とのsimilarityがむしろ高いことがわかった. (2) Fission yeast からras1タンパク性のファルネシル化を行うzymeの partially purified を行った.そのRESULT, このENzyme はUNKNOWN のタンパク性とCOMplex をFORMATION し, それがSTABILITY に Send and していること,また, matrix タンパクquality に対してdifferent なるreaction specificity をshows the presence of すenzyme group することを明らかにした. Analytical results of the speed theory The enzyme が recognition す る C-terminal arrangement を fission yeast の enzyme は matrix と す る こ と が 明 ら か に な っ た.