分裂酵母を用いた、細胞機能の系統的解析システムの開発研究

利用裂殖酵母进行细胞功能系统分析系统的研究与开发

• 批准号: 08878131
• 负责人: 藤山 秋佐夫
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878131/
• 关键词: ゲノム; 分裂酵母; 遺伝子発現; ras; DNAライブラリ; 突然変異; DNAライブラリー; 発現ベクター; cDNA

平成9年度研究実施結果:本研究の目的とするところは、分裂酵母のあらゆる変異を網羅する変異体ライブラリを用い、細胞機能をゲノム的に明らかにすることである。しかし、分裂酵母の全ゲノム配列が2〜3年中に決定される事態を鑑み、まず正常細胞の全ゲノムDNAライブラリを用いた解析を先行させるべく、当初計画に若干の変更を加えた。すなわち、前年度に作成した高密度メンブレン化した単一遺伝子ライブラリを重点的に用いた発現ヒエラルキー解析である。まず、富栄養培地と合成培地の各々から増殖期にある酵母細胞を集め、poly(A)+mRNAを抽出精製した。全ゲノムDNAライブラリにはrRNAなど大量に発現される遺伝子から、極微量にしか発現されないもの、また、構成的に発現される遺伝子や条件依存的に発現される遺伝子をコードするクローンが含まれるが、上記2種類の精製mRNAを用い、発現レベルの違いに応じて系統的に分離したサブライブラリを構築した。このようなライブまた、シグナル伝達系のモデルとしてラリを準備することにより、ディファレンシャルに発現される全遺伝子をスクリーニングすることが可能になると同時に、各種の条件下を通じて共通に発現される遺伝子群をハウスキーピング遺伝子として正確に定義付け、それらの構造を明らかにすることができる。本年度の研究では上記2条件で共通に発現されるクローン群を選別し、そのうち100クローンについて部分配列の決定と相同性検索による性状解析を行った。さらに、細胞内情報伝達に関与するras1遺伝子に依存的に発現される遺伝子群のスクリーニングを行い、ras1依存的に発現する複数の新規遺伝子を単離した。

Results of the Heisei 9-year study: The purpose of this study is to investigate the effects of different enzymes and cell functions on the growth and development of yeast cells. The complete DNA sequence of the dividing yeast is determined in 2 to 3 years, and the complete DNA sequence of the normal cells is analyzed in advance. In the past year, the company has made high-density products, such as electronic products, etc. The yeast cells were collected and poly(A)+mRNA was extracted during the growth period. The entire human DNA genome is composed of genes that are detected in large quantities, such as rRNA, and in extremely small quantities. In addition, the constituent genes and condition-dependent genes are contained in the computer, and the two types of refined mRNA described above are used to detect and detect genes in violation of regulations. This is the first time that a person has ever been involved in a communication system. The first time that a person has been involved in a communication system, the second time that a person has been involved in a communication system, the third time that a person has been involved in a communication system, the fourth time that a person has been involved in a communication system, the fourth time that a person has been involved in a communication system. This year's study was conducted on the basis of the above 2 conditions: common occurrence, selection, determination, identity search, and trait analysis. In addition, intracellular information transmission is related to ras1 gene dependent transmission, and a plurality of new genes are generated.