B細胞アポトーシスに基づく自己トレランスの制御機構の研究

基于B细胞凋亡的自身耐受调控机制研究

• 批准号: 06265218
• 负责人: 鍔田 武志
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06265218/
• 关键词: Bリンパ球; アポトーシス; 抗体レセプター; CD40; CD40L; トレランス; Tリンパ球; 分化

B細胞抗原CD40を介するシグナルが正常B細胞の抗原レセプター(細胞表面免疫グロブリン:sIg)クロスリンクによるアポトーシスを阻害するか検索した。正常マウス腹腔に抗Ig抗体を投与し、sIgを強くクロスリンクして腹腔B細胞のアポトーシスを誘導する系に抗CD40抗体を加えても腹腔B細胞のアポトーシスは阻止できなかった。このようなin vivoに抗体を投与する系では、十分量の抗体を投与できなかった可能性があったので、少量の抗体で検索できるようなin vitroの系を用いてCD40シグナルの正常B細胞のアポトーシスへの作用を検索した。我々は、マウス脾臓B細胞をin vitroでビオチン化抗Ig抗体とアビジンの組み合わせ、または固相化抗Ig抗体によりsIgを強くクロスリンクすることによりB細胞の細胞死を誘導する事を示し、腹腔B細胞のみならず脾臓B細胞もsIgの強いクロスリンクにより死滅するこを示した。さらに、我々はこの系を用いて抗CD40抗体や、CD8αとCD40Lのキメラ分子が脾臓B細胞のsIgクロスリンクによる細胞死を抑制することを示し、活性化T細胞上のCD40のリガンドであるCD40L分子がB細胞に反応するとB細胞の抗原による細胞死を抑制することを明らかにした。この結果は、抗原と反応したB細胞が細胞死をおこしてトレランスが誘導されるか、活性化して抗体反応をおこすかの決定でCD40L/CD40系の重要な役割を果たすことを示唆している。また、SRαプロモーターによって制御されるCD40L遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを樹立した。このマウスでは、CD40Lの発現レベルが低く、フローサイトメトリーでCD40L分子の過剰発現は観察できなかったが、リンパ節でプラズマの細胞の増生を認め、CD40シグナルがB細胞の分化に重要であることが明らかとなった。

B cell antigen CD40 mediates the expression of normal B cell antigens (cell surface immunity:sIg). Anti-CD40 antibodies are administered to normal peritoneal cells, and anti-CD40 antibodies are administered to normal peritoneal cells. In vivo antibody administration system, ten percent of the antibody is administered in vitro, and a small amount of the antibody is administered in vitro to investigate the role of CD40 in the development of normal B cells. We have shown that B cells in the abdominal cavity can be induced to die by strong anti-Ig antibodies in vitro and by strong anti-Ig antibodies in vitro. In addition, we have demonstrated that anti-CD40 antibodies, CD8 α and CD40L molecules inhibit cell death in sIg cells of spleen B cells, and CD40L molecules inhibit cell death in sIg cells of spleen B cells by activating CD40 on T cells. The results showed that antigen and antibody responses to B cell death, induction, activation, and antibody responses were important for determining the CD40L/CD40 lineage. The CD40L gene was introduced into the system. CD40L is important for B cell differentiation. CD40L is the most important component of B cell differentiation.

项目成果

Tsubata,T.,Murakami,M.,Nisitani,S.and Honjo,T.: "Molecular mechanisms for B lymphocyte selection induction and regulation of antigen receptor-mediated apoptosis of mature B cells in normal mice and their defect in autoimmunity-prone mice." Proc.R.Soc.Lond

Tsubata，T.，Murakami，M.，Nisitani，S. 和 Honjo，T.：“正常小鼠中 B 淋巴细胞选择诱导和抗原受体介导的成熟 B 细胞凋亡的分子机制及其在自身免疫倾向中的缺陷

Nisitani,S.,Tsubata,T.,Honjo,T.: "Lineage marker-negative lymphocyte precursors derived from embryonic stem cells in vitro differentiate into mature lymphocytes in vivo." International Immunology. 6. 909-916 (1994)

Nisitani,S.、Tsubata,T.、Honjo,T.：“源自胚胎干细胞的谱系标记阴性淋巴细胞前体在体外分化为体内成熟的淋巴细胞。”

Tsubata,T.,Murakami,M.Honjo,T.: "Antigen reseptor cross-linking induces peritoneal B-cell apoptosis in normal but not autoimmunity-prone mice." Current Biology. 4. 8-17 (1994)

Tsubata,T.、Murakami,M.Honjo,T.：“抗原受体交联会诱导正常小鼠腹膜 B 细胞凋亡，但不会诱导自身免疫性小鼠发生凋亡。”

Murakami,M.,Tsubata,T.,Shinkura,R.,Nisitani,S.,et al.: "Oral administration of lipopolysaccharides activates B-1 cells in the peritoneal cavity and the lamina propria of the gut and induces autoimmune symptoms in an autoantibody transgenic mouse." Journal

Murakami,M.,Tsubata,T.,Shinkura,R.,Nisitani,S.,et al.：“口服脂多糖可激活腹膜腔和肠道固有层中的 B-1 细胞，并诱导自身免疫症状