Bリンパ球を用いたレクチンを起点とする細胞表面分子ネットワークの機能解明

使用 B 淋巴细胞对源自凝集素的细胞表面分子网络进行功能阐明

• 批准号: 21H02679
• 负责人: 鍔田 武志
• 金额: $ 11.23万
• 依托单位: Nihon University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02679/
• 关键词: CD22; シアル酸; レクチン; B細胞; LFA-1; シスリガンド; Siglec; 細胞接着

CD22は主にBリンパ球に発現する抑制性の受容体で、細胞外領域でα2,6シアル酸を特異的に認識するレクチンである。我々は、Proximity labeling法を用いてCD22のシスリガンドを網羅的に同定し、これまでにシスリガンドであることが示唆されていたIgM, CD45,CD22の他にLFA-1を新規のシスリガンドとして同定した。LFA-1は細胞の接着や移動に関わり、チロシンキナーゼであるFAKはLFA-1を介するシグナル伝達で重要な役割を果たす。CD22が新規シスリガンドであるLFA-1の機能を制御するか、さらにその制御が重要な生命機能を担うかを明らかにするため、本研究では、CD22がシアル酸を介してLFA-1と会合することで、LFA-1と会合するチロシンキナーゼFAKなどの分子のリン酸化を制御するか、さらに、FAKが関わる細胞の移動や伸展を制御するかの解析を行なった。その結果、CD22欠損B細胞ではB細胞抗原受容体（BCR）架橋の際のFAKのリン酸化が増強していること、さらに、CD22のリガンドであるα2,6シアル酸を欠損するST6GalI欠損B細胞でもBCR架橋の際のFAKのリン酸化が増強することを明らかにし、CD22がシアル酸認識を介してFAKのリン酸化を抑制することを示した。抗LFA-1抗体をコートしたプレート上でのB細胞の伸展も同様にCD22がシアル酸依存的に抑制していることが明らかになった。さらに、B細胞をLFA-1のリガンドであるICAM-1の組み換えタンパク質をコートしたプレート上で細胞の運動をビデオ解析したところ、CD22がシアル酸依存的にB細胞の移動を抑制していることが明らかとなった。これらの結果から、CD22がLFA-1をシスリガンドとして認識することで、LFA-1が関わるシグナル伝達を制御し、B細胞の伸展や移動を制御することが明らかとなった。

CD22 は main に B リ ン パ ball に 発 now す る inhibitory の let body で, extracellular domain で alpha 2, 6 シ ア ル acid を specific に know す る レ ク チ ン で あ る. I 々 は, Proximity を labeling method with い て CD22 の シ ス リ ガ ン ド を snare に with し, こ れ ま で に シ ス リ ガ ン ド で あ る こ と が in stopping さ れ て い た IgM, CD45, CD22 の he に を LFA - 1 new rules の シ ス リ ガ ン ド と し て with fixed し た. LFA - 1 は の then や cell に masato わ り, チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ で あ る FAK (は を LFA - 1 interface す る シ グ ナ ル 伝 で important な "を cut fruit た す. CD22 が new rules シ ス リ ガ ン ド で あ る LFA - 1 の function を suppression す る か, さ ら に そ の suppression が important な vital functions を bear う か を Ming ら か に す る た め, this study で は, CD22 が シ ア を ル acid medium し て LFA - 1 meet と す る こ と で, LFA - 1 meet と す る チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ FAK (な ど の の molecule リ ン acidification を suppression す る か, さ ら に, FAK (が masato わ る の cell や stretch を suppression す る か の parsing line を な っ た. そ の results, CD22 owe damage B cells で は B cell antigen by let body (BCR) bridging の interstate の FAK (の リ ン acidification が raised strong し て い る こ と, さ ら に, CD22 の リ ガ ン ド で あ る alpha 2, 6 シ ア ル acid を owe loss す る ST6GalI owe damage of B cell で も BCR bridging の interstate の FAK (の リ ン acidification が raised strong す る こ と を Ming ら か に し, CD22 が シ ア ル acid know を interface し て FAK (の リ ン acidification を inhibit す る こ と を shown し た. Anti LFA - 1 antibodies を コ ー ト し た プ レ ー ト on で の B cells の stretch も with others in に CD22 が シ ア ル acid dependent に inhibiting し て い る こ と が Ming ら か に な っ た. さ ら に, B cell を LFA - 1 の リ ガ ン ド で あ る の ICAM - 1 set of み in え タ ン パ ク qualitative を コ ー ト し た プ レ ー ト の で on cell movement を ビ デ オ parsing し た と こ ろ, CD22 が シ ア ル acid dependent に B cells の mobile を inhibiting し て い る こ と が Ming ら か と な っ た. こ れ ら の results か ら, CD22 が LFA - 1 を シ ス リ ガ ン ド と し て know す る こ と で, LFA - 1 が masato わ る シ グ ナ ル 伝 royal し を system, B cells の stretch や mobile を suppression す る こ と が Ming ら か と な っ た.

项目成果

デューク大学/スタンフォード大学(米国)

杜克大学/斯坦福大学（美国）

Roles of SHP-1-activating inhibitory receptors in B lymphocyte tolerance and quality control.

SHP-1 激活抑制性受体在 B 淋巴细胞耐受和质量控制中的作用。

• 发表时间: 2022
• 作者: Nakai T;Saigusa D;Iwamura Y;Matsumoto Y;Umeda K;Kato K;Yamaki H;Tomioka Y;Hirano I;Koshiba S;Yamamoto M;Suzuki N*;Takeshi Tsubata
• 通讯作者: Takeshi Tsubata

抑制性B細胞共受容体 CD22(Siglec-2) による糖鎖依 存的な免疫不全B細胞の機能回復

抑制性 B 细胞共受体 CD22 (Siglec-2) 恢复碳水化合物依赖性免疫缺陷 B 细胞的功能

• 发表时间: 2021
• 作者: 赤津ちづる;Alborzian-Deh-Sheikh Amin;鍔田武志.
• 通讯作者: 鍔田武志.

エアランゲン大学(ドイツ)

埃尔兰根大学（德国）

An anti-CD22 antibody that expands regulatory B cells inhibits development of type 1 diabetes and allograft rejection in mouse models

一种可扩增调节性 B 细胞的抗 CD22 抗体可抑制小鼠模型中 1 型糖尿病和同种异体移植排斥的发生

• 发表时间: 2022
• 作者: Wang Long;Shinji Kunitake;Ayaka Endo;Koji Atarashi,Takeshi Tsubata.
• 通讯作者: Koji Atarashi,Takeshi Tsubata.