心筋ミオシン軽鎖キナーゼのアクチン結合性を介した新しい収縮制御様式の検討

心肌肌球蛋白轻链激酶肌动蛋白结合介导的新收缩控制模式的研究

• 批准号: 06274203
• 负责人: 小浜 一弘
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274203/
• 关键词: 心筋; カルシウム・イオン; アクチン; ミオシン; ミオシン軽鎖キナーゼ; 強心作用

平滑筋ではミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)が収縮制御の主役をなし、これによりミオシンがリン酸化され、アクチン・ミオシン相互作用が開始されるとされている。私どもは、このMLCKにはアクチン結合性があり、ミオシンリン酸化とは独立に相互作用を抑制するという作用を検出した。そしてこれがCa^<2+>存在下のカルモジュリンにより解除されることを発表した。この抑制作用は強力で、類似の機能をもつ平滑筋カルデスモンの100倍近くなる。一方、トロポニン-トロポミオシン系はCa^<2+>が存在しない時にはアクチン・ミオシン相互作用に抑制をかけ、Ca^<2+>によりトロポニン経由で抑制が解除される。上のような結果から、i)カルモジュリン-MLCK系がトロポニン-トロポミオシン系に対するCa^<2+>の作用と酷似するため、ii)心筋にはカルデスモンは存在しないとされているため、カルモジュリン-MLCK系が心筋でも収縮制御の一端を担っているのではないかという着想にいたった。心筋にはミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)が存在していることは知られているが、本研究ではまづi)アクチン結合性の高いMLCKのisoformを平滑筋の経験を生かして精製することを目的とする(研究計画・方法欄参照)。次に、ii)アクチン結合成蛋白質としての性質、iii)心筋ミオシンを用いてのin vitro motility assayによるMLCKのアクチン-ミオシン相互作用の抑制効果、iv)Ca^<2+>存在下のカルモジュリン(CaM)を調べ、CaM-MLCK系の制御能を明確にする。最終的にはMLCKの限定分解によるドメイン構造の決定、及び非リン酸化型ミオシンを用いての作用の検討を行い、心筋MLCKの構造と機能に検討を加える。

Smooth tendon ではミオシン軽 lock キナーゼ(MLCK) がshrinkage control のmain protagonist をなし, これによりミオシンがリン acidification され, アクチン・ミオシン interaction がstart されるとされている. Private どもは, このMLCK にはアクチン binding があり, ミオシンリン acidification とは independent に interaction を inhibit する という effect を検出した.そしてこれがCa^<2+>The presence of のカルモジュリンによりreleases the されることを発表した. The inhibitory effect is strong, and the function is similar to the smooth muscle smoothing muscle, which is 100 times closer to that of the くなる. One side, Toroロポニン-Toroロポミオシン system はCa^<2+>がexistent しない时 にはアクチン・ミオシンinteraction is inhibited by をかけ, Ca^<2+>によりトロポニン経 is inhibited by で and released by される. The result of the upper のようなから、i)カルモジュリン-MLCK series がトロポニン-トロThe function of the ポミオシン system に対するCa^<2+> is very similar to するため, ii) the heart muscle にはカルデスモンはexistent しないとされているため, カルモジュリン-MLCK series The heart muscle is contracted and the end of the heart is restrained. Heart muscle lock キナーゼ(MLCK) していることはknowledge られているが, this study ではまづi) アクチン combination MLCK's MLCK is an isoform that is smooth and smooth, and it is refined and refined (refer to the research plan and method column). Second, ii) the properties of アクチン combining into proteins, iii) the properties of いての in vitro motility of heart muscle ミオシンをassayによるMLCKのアクチン-ミオシン interaction inhibition effect, iv) Ca^<2+ >There are のカルモジュリン (CaM) をtone and CaM-MLCK series のcontrolをclear にする. The final determination of the limited decomposition of the にはMLCK, the structure of the によるドメイン, and the non-びリン acidified typeオシンを Uses いてのeffectの検questionを行い, and Shinsuji MLCKのstructural and functionalに検questionをaddsえる.