课题基金 / 基金详情

イオン・チャネル型受容体に対する細胞骨格蛋白質の制御作用

イオン・チャネル型受容体に対する細胞骨格蛋白質の制御作用
细胞骨架蛋白对离子型受体的调节作用
批准号：
08878145
负责人：
小浜 一弘
金额：
$1.15万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 1997
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878145/
关键词：
プリン受容体カプサイシン受容体パッチイブンプ細胞骨格PC-12細胞アンチン神経細胞発現蛋白質パッチクランプ細胞外マトリックス

项目摘要

项目成果

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本萌芽的研究ではイオン・チャネル型の受容体がどの様に細胞骨格により修飾されるかという問題に分子生物学的手法を応用してパッチクランプ法でせまろうとするものである。古典的には、細胞骨格を破壊するサイトカシンやコルヒチンを細胞外から与えイオンチャネルを修飾したという報告がある。従って、イオン・チャネル型受容体もアクトミオシン系やチュブリン・ダイニン系の用を受けると考えるのも理由がない訳ではない。本研究ではPC-12細胞を利用するが、最近、プリン受容体P2X_2が同定・クローニングされ、昨年度には、これをパッチクランプ法で検出できるようになり、細胞内のアクチン線維を修飾する薬物の作用を検討した。しかし、サイトカラシン(アクチン切断作用)及びファロジン(アクチン安定化作用)いずれも著しい効果を得ることができなかった。本年度はP2X_2をコードするcDNAをPCR法にてPC-12細胞より直接的に得て、受容体を発現系蛋白質化して、受容体とアクチンの直接作用を蛋白質生化学的に検出することを試みた。しかし、大腸菌内での発現蛋白質化には発現量の点で成功しかなかった。しかし、このアイデアはカプサイシン受容体で偶然に生かすことができた。即ち、最近発表されたこの受容体の配列を後根神経節ホモジェネートよりPCR法で得て、大腸菌内で大量に発現することができた。これを精製することができ、アクチンとの結合性を調べることが可能となった。先月の予備実験では確かに結合性が検出でき、本萌芽的研究の目的の一部が達成できた。
期刊论文(9)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Kohama,K.: "Large scale culture of Physarum(分担)" Celis,J.E.(ed) cell Biology : A laboratory handbook (Academic Press), 9 (1997)
Kohama, K.：“大规模培养绒泡菌” Celis, J.E.（编）细胞生物学：实验室手册（学术出版社），9 (1997)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Hayashi,K.: "Modulatory role of drebrin on the cytoskeleton within dendritic spines in the cerebral cortex." J.Neurosci.16. 7161-7170 (1996)
Hayashi,K.：“drebrin 对大脑皮层树突棘内细胞骨架的调节作用。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sasaki,Y.: "Inhibition by drebrin of the actin-bundling activity of brain fascin,a protein localized in filopodia of growth cones." J.Neurochem.66. 980-988 (1996)
Sasaki，Y.：“drebrin 抑制脑肌成束蛋白的肌动蛋白成束活性，脑肌成束蛋白是一种位于生长锥丝状伪足中的蛋白质。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
"Myosin light chain kinase : an actin-binding proctin that regulates an ATP-dependent interaction with myosin." Trends Pharmacol.Sci.17. 284-287 (1996)
“肌球蛋白轻链激酶：一种肌动蛋白结合蛋白，调节 ATP 依赖性与肌球蛋白的相互作用。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 8 条
    カルシウム感受性ミオシンをバイオチップとして利用する試み
    • 批准号：
      19659059
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.05万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    神経細胞膜の裏打ちをするアクトミオシン系蛋白質は受容体機能の制御因子たり得るか?
    • 批准号：
      13878160
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.22万
    • 财政年份：
      2001
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    カルシウム感受性のあるミオシン分子のモータードメインの機能的発現の試み
    • 批准号：
      12030205
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.15万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    カルシウム感受性のあるミオシン分子のモ-タ-・ドメインの機能的発現の試み
    • 批准号：
      11156204
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.09万
    • 财政年份：
      1999
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    海外基金