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心筋ミオシン軽鎖キナーゼのアクチン結合を介した新しい収縮制御様式の検討

心筋ミオシン軽鎖キナーゼのアクチン結合を介した新しい収縮制御様式の検討
心肌肌球蛋白轻链激酶肌动蛋白结合介导的新收缩控制模式的研究
批准号：
08258203
负责人：
小浜 一弘
金额：
$1.22万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08258203/
关键词：
心筋カルシウムイオンアクチンミオシンミオシン軽鎖キナーゼ平滑筋発現蛋白質PCR

项目摘要

项目成果

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平滑筋ではミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)が収縮制御の主役をなし、これによりミオシンがリン酸化され、アクチン・ミオシン相互作用が開始されるとされている。私どもは、このMLCKにはアクチン結合性があり、ミオシンリン酸化とは独立に相互作用を抑制するという作用を検出した。そしてこれがCa^<2+>存在下のカルモジュリンにより解除されることを発表した。この抑制作用は強力で、類似の機能をもつ平滑筋カルデスモンの100倍近くなる。一方、トロポニン-トロポミオシン系はCa^<2+>が存在しない時にはアクチン・ミオシン相互作用に抑制をかけ、Ca^<2+>によりトロポニン経由で抑制が解除される。上のような結果から、カルモジュリン(CaM)-MLCK系がトロポニン-トロポミオシン系に対するCa^<2+>の作用と酷似するため、カルモジュリン-MLCK系が心筋でも収縮制御の一端を担っているのではないかという着想にいたった。平成7年度の本重点研究ではこの着想を証明する事ができた。平成8年度ではMLCKのアクチン結合部位の構造と機能を解析するのに成功した。平滑筋MLCKをコードするcDNAを利用し、アクチン結合部位に対するDNAをRT-PCRにて自由にデザインした。このDNAをpET発現ベクターに組込み組換体発現蛋白質として大腸菌よりアクチン結合蛋白質を得た。いくつかの組換体蛋白質のアクチン結合性とアクチン・ミオシン相互作用の抑制と比較し、N末端より41残基までの配列がアクチン結合とそれに起因する抑制現象に重要な働きをしている事が明かとなった。
期刊论文(16)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Hayakawa,K.: "Reversible effects of Okadaic acid and Microcyotin-LR on the ATP-dependent interaction between actin and myosin." J.Biochem.117. 509-514 (1995)
Hayakawa, K.：“冈田酸和微细胞素-LR 对肌动蛋白和肌球蛋白之间 ATP 依赖性相互作用的可逆作用。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kohama,K.: "Myosin light chain kinase : an actin-binding proctin that regulates an ATP-dependent interaction with myosin." Trends Pharmacol.Sci.17. 284-287 (1996)
Kohama,K.：“肌球蛋白轻链激酶：一种肌动蛋白结合蛋白，调节 ATP 依赖性与肌球蛋白的相互作用。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ishikawa,R.: "Purification of an ATP-dependent actin-binding prtein from a lower eukaryote,Physarum polycepharum." Biochem.Biophys.Res.Commun.212. 347-352 (1995)
Ishikawa,R.：“从低等真核生物多头绒泡菌中纯化 ATP 依赖性肌动蛋白结合蛋白。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sato,M.: "Myosin light chain kinase from vascular smooth muscle inhibit the ATP-dependent interaction between actin and myosin by binding to actin." J.Biochem.118. 1-3 (1995)
Sato,M.：“来自血管平滑肌的肌球蛋白轻链激酶通过与肌动蛋白结合，抑制肌动蛋白和肌球蛋白之间 ATP 依赖性相互作用。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 8 条
    カルシウム感受性ミオシンをバイオチップとして利用する試み
    • 批准号：
      19659059
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.05万
    • 财政年份：
      2007
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    神経細胞膜の裏打ちをするアクトミオシン系蛋白質は受容体機能の制御因子たり得るか?
    • 批准号：
      13878160
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $1.22万
    • 财政年份：
      2001
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    カルシウム感受性のあるミオシン分子のモータードメインの機能的発現の試み
    • 批准号：
      12030205
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.15万
    • 财政年份：
      2000
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    カルシウム感受性のあるミオシン分子のモ-タ-・ドメインの機能的発現の試み
    • 批准号：
      11156204
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
    • 资助金额：
      $1.09万
    • 财政年份：
      1999
    • 负责人：
      小浜 一弘
    • 依托单位：
      Gunma University
    海外基金