权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

心筋ミオシン軽鎖キナーゼのアクチン結合を介した新しい収縮制御様式の検討

心肌肌球蛋白轻链激酶肌动蛋白结合介导的新收缩控制模式的研究

基本信息

批准号：
08258203
负责人：
小浜一弘
金额：
$ 1.22万
依托单位：
Gunma University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

平滑筋ではミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)が収縮制御の主役をなし、これによりミオシンがリン酸化され、アクチン・ミオシン相互作用が開始されるとされている。私どもは、このMLCKにはアクチン結合性があり、ミオシンリン酸化とは独立に相互作用を抑制するという作用を検出した。そしてこれがCa^<2+>存在下のカルモジュリンにより解除されることを発表した。この抑制作用は強力で、類似の機能をもつ平滑筋カルデスモンの100倍近くなる。一方、トロポニン-トロポミオシン系はCa^<2+>が存在しない時にはアクチン・ミオシン相互作用に抑制をかけ、Ca^<2+>によりトロポニン経由で抑制が解除される。上のような結果から、カルモジュリン(CaM)-MLCK系がトロポニン-トロポミオシン系に対するCa^<2+>の作用と酷似するため、カルモジュリン-MLCK系が心筋でも収縮制御の一端を担っているのではないかという着想にいたった。平成7年度の本重点研究ではこの着想を証明する事ができた。平成8年度ではMLCKのアクチン結合部位の構造と機能を解析するのに成功した。平滑筋MLCKをコードするcDNAを利用し、アクチン結合部位に対するDNAをRT-PCRにて自由にデザインした。このDNAをpET発現ベクターに組込み組換体発現蛋白質として大腸菌よりアクチン結合蛋白質を得た。いくつかの組換体蛋白質のアクチン結合性とアクチン・ミオシン相互作用の抑制と比較し、N末端より41残基までの配列がアクチン結合とそれに起因する抑制現象に重要な働きをしている事が明かとなった。

The smooth tendon is the key to the contraction control of the chain. The smooth tendon is the key to the contraction control of the chain. The interaction between the two groups was inhibited. In the presence of Ca^<2+>, the solution of the problem is found This inhibition effect is strong, similar to the function of smooth muscle, close to 100 times. The interaction between Ca^<2+> and Ca^<2 +> is inhibited by Ca^<2 +>. As a result, the MLCK system is similar to the CaM system, and the MLCK system is similar to the CaM system. This year's focus on research is to prove that In 2008, the structure and function of MLCK were analyzed successfully. The smooth muscle MLCK gene is used to bind DNA to RT-PCR gene. DNA binding proteins are produced in E. coli. The inhibition of the interaction between protein and protein is important because of the N-terminal 41 residue alignment.