心筋ミオシン軽鎖キナーゼのアクチン結合を少した新しい収縮抑制様式の検討

研究涉及少量肌动蛋白结合心肌肌球蛋白轻链激酶的新收缩抑制模式

• 批准号: 07266203
• 负责人: 小浜 一弘
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07266203/
• 关键词: 心筋; カルシウムイオン; アクチン; ミオシン; ミオシン軽鎖キナーゼ; 強心作用

平滑筋ではミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)が収縮制御の主役をなし、これによりミオシンがリン酸化され、アクチン・ミオシン相互作用が開始されるとされている。私どもは、このMLCKにはアクチン結合性があり、ミオシンリン酸化とは独立に相互作用を抑制するという作用を検出した。そしてこれがCa^<2+>存在下のカルモジュリンにより解除されることを発表した。この抑制作用は強力で、類似の機能をもつ平滑筋カルデスモンの100倍近くなる。一方、トロポニン-トロポミオシン系はCa^<2+>が存在しない時にはアクチン・ミオシン相互作用に抑制をかけ、Ca^<2+>によりトロポニン経由で抑制が解除される。上のような結果から、カルモジュリン(CaM)-MLCK系がトロポニン-トロポミオシン系に対するCa^<2+>の作用と酷似するため、カルモジュリン-MLCK系が心筋でも収縮抑制の一端を担っているのではないかという着想にいたった。平成6年度の本重点研究ではこの着想を骨格筋にて照明する事ができた。さらに、心筋よりアクチン結合性のMLCK isoformを精製することができ、この着想に自信がもてるようになった。心筋にはミオシン軽鎖キナーゼ(MLCK)が存在する事は知られているが、私どもは(i)これを平滑筋の経験を生かして精製することができた。次に、(ii)心筋ミオシンを用いてのin vitro motility assayによるMLCKのアクチン-ミオシン相互作用の抑制効果と(iii) Ca^<2+>存在下のカルモジュリン(CaM)を調べ、CaM-MLCK系がこの抑制を解除することを明らかにした。これにより着想の基本は達成されたと思う。今後、心筋MLCKをAキナーゼでリン酸化し、その結果をしらべる。これによりCaM-MLCK系とβ作用薬による強心作用との関係に検討を加えたい。

The smooth tendon is the key to the contraction control of the chain. The smooth tendon is the key to the contraction control of the chain. The interaction between the two groups was inhibited. In the presence of Ca^<2+>, the solution of the problem is found This inhibition effect is strong, similar to the function of smooth muscle, close to 100 times. The interaction between Ca^<2+> and Ca^<2 +> is inhibited by Ca^<2 +>. The above results show that the MLCK system is similar to the Ca <2+> system. This year's focus on research is to improve the quality of lighting. The MLCK isoform is refined, and the MLCK isoform is self-confident. The heart of the heart is the heart of the heart. The heart of the heart is the heart of the heart. Secondly,(ii) the inhibition effect of MLCK interaction in vitro motility assay;(iii) the modulation of CaM in the presence of Ca^<2+>; and the release of CaM-MLCK system inhibition. This is the first time I've thought about it. In the future, the heart muscle MLCK will be released and the results will be released. The CaM-MLCK system is a complex system of beta interactions.

项目成果

Sato, M.: "Myosin light chain kinase from vascular smooth muscle inhibits tht ATP-dependent interaction between actin and myosin by binding to actin" J. Biochem.118. 1-3 (1995)

Sato, M.：“来自血管平滑肌的肌球蛋白轻链激酶通过与肌动蛋白结合来抑制肌动蛋白和肌球蛋白之间的 ATP 依赖性相互作用”J. Biochem.118。

Kohama, K.: "Smooth muscle contraction. New regulatory modes." Japan Sci. Soc. Press & S. Karger, 159 (1995)

Kohama, K.：“平滑肌收缩。新的调节模式。”

Hayakawa, K.: "Reversible effects of Okadaic acid and Microcyotin-LR on the ATP-dependent interaction between actin and myosin." J. Biochem.117. 509-514 (1995)

Hayakawa, K.：“冈田酸和微细胞素-LR 对肌动蛋白和肌球蛋白之间 ATP 依赖性相互作用的可逆作用。”

Ishikawa, R.: "Purifecation of an ATP-dependent actin-binding protein from a lower eukaryote, physarum polycepharum." Biochem. Biophys. Res. Commun.212. 347-352 (1995)

Ishikawa, R.：“从低等真核生物多头绒泡菌中纯化 ATP 依赖性肌动蛋白结合蛋白。”

Higashi-Fujime, S.: "The fastest actin-based motor protein from the green alga, Chara, and its distinct mode of interaction with actin." FEBS Lett.375. 151-154 (1995)

Higashi-Fujime, S.：“来自绿藻 Chara 的最快的基于肌动蛋白的运动蛋白，及其与肌动蛋白相互作用的独特模式。”