心筋細胞ATP依存性カリウムチャネルの受容体および機械刺激依存性制御とその異常

心肌细胞 ATP 门控钾通道的受体和机械刺激依赖性调节及其异常

• 批准号: 06274217
• 负责人: 倉智 嘉久
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06274217/
• 关键词: ATP依存性カリウムチャネル; HEK293細胞; トランスフェクション; パッチクランプ法; キメラクローン; 点変異導入クローン

ラットの心臓からATP依存性カリウムチャネル(K_<ATP>チャネル)がクローニングされ(rcK_<ATP>-1,Ashford et al.Nature370,456-459,1994)このチャネルの一次構造が明らかになった。研究代表者らはこのクローンを譲り受け,ヒト腎臓由来HEK293細胞にトランスフェクションし、パッチクランプ法を用い電気生理学的にこのチェネルの機能を解析した。これによって,このチャネルは心筋細胞から直接記録したK_<ATP>チャネルと単一チャネルコンダクタンスの大きさや開閉のキネティクスなどはほぼ同一であるが,細胞内のATPに対する感受性が一定でないことや,グリベンクラミドなどのスルフォニルウレア剤によって抑制されない,などの相違点を有することが明らかになった。この相違の一つの機序として,このチャネルが相同性を有する異なるサブユニットの重合によって機能単位となることが示唆されたので,研究代表者らはrcK_<ATP>-1をプローブにしてマウス脳のcDNAライブラリーをスクリーニングし,rcK_<ATP>-1と約80%の相同性を有するチャネルおよびそのsplicing variantを単離することに成功した。現在これらの複数のクローンを組み合わせて発現させ,このチャネルがいかなるサブユニット構造をとって機能しているかを解析している。さらにキメラクローンや点変異導入クローンを作製し,種々のKチャネル開口薬やnucleotide diphosphateによるK_<ATP>チャネル活性化の分子機構について実験を行っている。

The primary structure of the ATP dependent complex (K_c_<ATP><ATP>c The research representatives expressed their concern about the role of HEK293 cells in the development of kidney disease, and analyzed the function of HEK293 cells by electrophysiological methods. This <ATP>is the first time that ATP has been detected in the cells of the heart muscle cells. It is recorded directly in the cells of the heart muscle cells. The cells of the heart muscle cells. The sequence of these sequences is different, and the cloning variants are identical. The research representative successfully cloned the rcK_<ATP>-1 cDNA sequence, and cloned the splicing variant of the rcK_<ATP>-1 cDNA sequence. Now, we can combine these two kinds of information to form a new structure, which can be used to analyze the information. In addition, the molecular mechanism for the activation of K_(2)-<ATP>C_2H_2O_(3) is also discussed.