熱ショック・ストレス蛋白質の機能・発現機構とその制御

热激应激蛋白的功能、表达机制及其调控

• 批准号: 06282121
• 负责人: 野瀬 清
• 金额: $ 10.69万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06282121/
• 关键词: 熱ショック蛋白; シャペロン; 温熱療法

低分子熱ショック蛋白質(hsp27)の増殖における機能につき、発現ベクターを用いた解析からhsp27高発現は増殖を抑制する可能性が示唆された。hsp27の各種変異体を用い、この増殖抑制には燐酸化およびC-末端での凝集体形成が関与することが示された(野瀬)。分泌経路の阻害剤で細胞を処理し、hsp47とコラーゲンとの結合、解離部位はゴルジ体以降で解離することが明らかとなった。また、この結合解離定数は定常状態では10^<-7>程度であることを示した(中井)。hsp90はカゼインキナーゼIIの活性サブユニットαのヘパリン結合部位に結合し、複合体を形成することを明らかした。またSV40T抗原とhsp90との複合体の再構成に成功した(宮田)。生存率でみた温熱耐性の程度と、hsp40,hsp70の細胞内含量とはいずれもよく相関し、hsp40も温熱耐性の良いマーカーとなることを示した。また、hsp70とhsp40が複合体を形成していることが明らかとなり、これらがシャペロンとして機能することが示された(大塚)。極低磁場を培養細胞に負荷し、hsp70の発現を見たが、HeLa,CHO細胞いずれにおいても発現上昇は見られなかった。また、マウスの移植腫瘍に加温処理を行い、hsp70のレベルを見たところ腫瘍周辺部で顕著な上昇が見られた(平岡)。細胞内に存在する腫瘍壊死因子(TNFα)が、細胞を加温した時の熱ショック因子(HSF1)のHSEへの結合能を増強させ、その結果hsp72の発現を高めることを見い出した。HSF1の結合能の増強は、細胞内TNFが直接HSF1に作用するわけではないことが示されている(渡辺)。U937細胞から核抽出液を調整し、hsc70遺伝子転写調節領域のDNA断片と結合する蛋白因子を検索し、増殖状態で異なったゲルシフトバンドが検出された。蛋白因子を精製して解析した結果、共通の蛋白質(分子量71,62kDa)が検出された(丸野内)。マウスリンパ節からγδ型T細胞をクローニングし、Vδ6またはVδ5を発現する2種のクローンを得た。Vδ6T細胞はhsp65と反応し、Vδ5T細胞はMethA繊維肉腫に反応性を示し、その反応性は抗hsp65抗体で阻害された(吉開)。カテプシンLの転写制御において、通常条件ではSp1が関与するが、誘導時にはEgr-1が転写制御領域に結合することが示された(石堂)。

The growth of low molecular weight protein (hsp27) was demonstrated by functional analysis and discovery of hsp27 protein. hsp27 has various heterogeneic functions, such as phosphorylation and C-terminal aggregation. It is now clear that the inhibitors of the secretory pathway are processed by cells, the binding of hsp47 to guanine, and the dissociation site beyond the body. The number of dissociations is constant, and the number of dissociations is constant<-7>. hsp90 is the active site for the formation of a complex. Successful reconstitution of SV40 T antigen and hsp90 complex (Miyata) The cell contents of hsp40 and hsp70 were correlated with the survival rate and the temperature tolerance of hsp40. Hsp70 and hsp40 form a complex. Hsp70 and HeLa cells were cultured under very low magnetic field, and Hsp70 and CHO cells were cultured under high magnetic field. HSP70 is the most important part of the transplant. The expression of TNFα, HSF1 and HSP72 in cells increased when the cells were heated. Increased binding capacity of HSF1 and the direct effect of TNF on HSF1 in cells were observed. U937 cell nuclear extract regulation, hsc70 gene transcription regulatory domain of DNA fragments and binding protein factor detection, reproductive status, different types of protein detection Protein factor purification and analysis results, common proteins (molecular weight 71,62kDa) were found (Marunouchi). Two kinds of T cells were found: γδ T cells and Vδ T cells. Vδ6T cells react to hsp65 and Vδ5T cells react to MethA and anti-hsp65 antibodies. In the case of the control field, the normal conditions are Sp1 and Egr-1, and the control field is combined.