TGFβにより誘導される遺伝子の細胞増殖における機能の解析

TGFβ诱导基因在细胞增殖中的功能分析

• 批准号: 04152030
• 负责人: 野瀬 清
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1992
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1992 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-04152030/
• 关键词: TGFβ; cDNAクローニング; 癌抑制遺伝子

TGFβで誘導される遺伝子として我々の分離した2個の遺伝子(TSC-36,HIC-5)の機能を解析した。TSC-36に関し、ペプチドを用いてその産物に対する抗体を作製し、蛋白質の検出を行なったところ、細胞外に放出される分泌蛋白質であることが明らかとなった。cDNAの構造からこれのコードする蛋白はフォリスタチンと部分的な相同性を持つことが示された。TSC-36mRNAは、rasにより形質転換した細胞で発現が消失し、フラットリバータントで発現が回復するので、がん形質と何らかの関連があると考えられた。そこでこの遺伝子の発現ベクターを作製し、培養センイ芽細胞への導入を行なった。導入細胞では、増殖、形態に大きな変化は見られなかった。しかし、NIH3T3細胞に各種がん遺伝子と共にTSC-36発現ベクターを導入し、フォーカス形成を見たところ、rafによる形質転換を抑制することが明らかとなった。従ってTSC-36遺伝子は、発癌抑制機能を持つことが考えられる。HIC-5に関しても、同様にペプチドを用いて抗体を作製し、細胞内の遺伝子産物の検出を行なった結果、分子量55KDaの核蛋白であることが示された。cDNAから予想されるアミノ酸配列から、この遺伝子は7個のZn-フィンガーを持つ蛋白質をコードすると考えられる。その特微からDNAに結合する転写因子と考えられた。このcDNAの発現ベクターを作製し、細胞への導入を行なったところ、マウス骨芽細胞で細胞の増殖を阻害したが、NIH3T3細胞には影響を与えなかった。従って、HIC-5遺伝子は細胞種に特異的に増殖抑制を行なうものと考えられる。TGFβは、増殖抑制因子として知られるが、その作用を媒介すると考えられる2個の新しい遺伝子が分離されたと考えられ、今後さらにこれらの機能を解析する必要がある。

Analysis of the function of TGFβ-induced gene fragments isolated from two gene fragments (TSC-36,HIC-5) TSC-36 is involved in the production of antibodies, protein production, extracellular release, and secretion of proteins. The structure of the cDNA is different from that of the protein. TSC-36mRNA is expressed in cells that have been transformed into ras and disappeared. The development and introduction of these genes into the culture medium were studied. The introduced cells are transformed into cells, and the morphology is large. NIH 3T3 cells contain a variety of genes, including TSC-36, which is responsible for the induction, formation, and inhibition of morphological and qualitative changes. The TSC-36 gene has the function of inhibiting cancer. HIC-5 is related to the production of antibodies, the production of intracellular protein products, and the production of nuclear proteins with molecular weight of 55KDa. The cDNA sequence is composed of seven amino acid sequences and seven amino acid sequences. A special DNA binding factor The expression of cDNA is controlled by the gene, and the introduction of the gene into NIH 3T3 cells is inhibited by the gene. The HIC-5 gene is a cell species-specific growth inhibitor. TGFβ is a growth inhibitor that acts as a mediator for the separation of two novel genes.

项目成果

Shibanuma,M.,Kuroki,T. & Nose,K.: "Cell-cycle dependent phosphorylation of HSP28 by TGFβ,and H_<>O_2 in normal mouse osteoblqstic cells (MC3T3-E_1),but not in the their ras-transformed cells." Biochem.Biophys.Res.Commun.187. 1418-1425 (1992)

Shibanuma, M.、Kuroki, T. 和 Nose, K.：“正常小鼠成骨细胞 (MC3T3-E_1) 中 TGFβ 和 H_<>O_2 对 HSP28 进行细胞周期依赖性磷酸化，但在 ras 转化细胞中则不然细胞。”Biochem.Biophys.Res.Commun.187. 1418-1425 (1992)

Shibanuma,M.,Kuroki,T. & Nose,K.: "Isolation of a gene encoding a putative leucine zipper structure that is induced by transforming growth factor β and other growth factors." J.Biol.Chem.267. 10219-10224 (1992)

Shibanuma, M.、Kuroki, T. 和 Nose, K.：“分离编码由转化生长因子 β 和其他生长因子诱导的假定亮氨酸拉链结构的基因。”J.Biol.Chem.267-。 10224 (1992)