好熱性古細菌の遺伝子

嗜热古菌基因

基本信息

  • 批准号:
    07265209
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 0.9万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1995
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1995 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

好酸好熱性古細菌Thermoplasmaは、細胞壁を持たないという点で古細菌の中でも特徴的な菌である。まず箱根大涌谷の温泉より温泉水を採集し、そこからThermoplasma属の菌を10株以上単離した。これらの細菌学的な性質を調べ、その中のいくつかの株については16SrRNAの塩基配列を決定することから、これらの株をThermoplasma acidophilumと同定した。次いでこれらの株がプラズミドを保持するかどうかについて検討を行い、15.2kbの環状DNAのプラズミドを発見した。単離したThermoplasma acidophilumのうちの一株について走査型原子間力顕微鏡によって細胞の形状を観察したところ、細胞内骨格様構造の存在を確認することができた。Sulfolobussp.strain7からロイシン合成系の酵素イソプロピルリンゴ酸脱水素酵素の遺伝子をクローニングし、その塩基配列を決定した。その結果、この酵素はイソプロピルリンゴ酸脱水素酵素の中で、最もイソクエン酸脱水素酵素に近い、すなわち祖先型の酵素であることがわかった。深海の冷水湧水地帯に生息するシロウリガイのエラ細胞内の共生細菌の16SrRNA遺伝子をPCRによって増幅し、クローニングしその塩基配列を決定した。この菌は他の熱水噴出孔付近に生息する同属のシロウリガイの共生細菌に近く、他のいくつかの熱水噴出孔付近にみられる無脊椎動物の細胞内共生細菌にも類縁関係を持っていることがわかった。シロアリ腸管内のにはセルロース分解酵素を出す原虫が共生しており、その細胞内にはメタン細菌が共生している。その162SrRNA遺伝子のPCRによる増幅とクローニング塩基配列の決定を行った。シロアリ、原虫との共生、それらの系統との関連等について今後検討する予定である。
嗜酸性考古学是一种独特的古细菌,因为它没有细胞壁。首先,从Hakone的Owakudani的温泉中收集了温泉水,从那里分离了10多种热量菌株。检查了这些细菌学特性,并确定了其中一些细菌学特性,并确定了16sRRNA序列,并将这些菌株鉴定为热肥大嗜酸菌。然后,我们研究了这些菌株是否保留质粒并发现15.2 kb的圆形DNA质粒。当使用扫描原子力显微镜观察到细胞的形状,用于孤立的嗜热嗜酸菌菌株之一时,证实了细胞内骨骼样结构的存在。从Sulfolobussp.strain7克隆了异丙基乳酸脱氢酶(一种亮氨酸合成酶)的基因,并确定碱基序列。结果,发现该酶是最接近异戊二酸盐脱氢酶的酶,也就是说,它是异丙基甲酸酯脱氢酶的祖先类型。生存在深海冷水春季区域中的麻风病g细胞中的共生细菌的16srRNA基因被PCR(克隆)放大,并确定其碱基序列。该细菌被发现接近同一属的共生细菌,该细菌生活在其他水热通风孔附近,并且与其他几种热液通风口附近发现的无脊椎动物内细胞内共生细菌有着相似的关系。在白蚁肠道内共生的原生动物,产生纤维素降解的酶,在这些细胞中共生存在甲烷细菌。通过PCR扩增162sRRNA基因,并确定克隆核苷酸序列。我们计划在将来考虑与白蚁和原生动物的共生及其与系统等的关系。

项目成果

期刊论文数量(22)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Tamakoshi, M et al: "Screening of stable proteins in an extreme thermophile, Thermus thermophilus." Mol. Microbiol.16. 1031-1036 (1995)
Tamakoshi, M 等人:“在极端嗜热菌——嗜热栖热菌中筛选稳定蛋白。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Bunnak, J. et al: "Orotate phosphoribosyltransferase from Thermus thermophilus: Overexpression in Escherichia coli, purification and characterization." J. Biochem.118. 1261-1267 (1995)
Bunnak, J. 等人:“来自嗜热栖热菌的乳清酸磷酸核糖基转移酶:在大肠杆菌中过度表达、纯化和表征。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Numata, K. et al: "Thermal stability of chimeric isopropylmalate dehyrogenase genes constructed from a thermophile and mesophile genes." Protein Engineering. 8. 39-44 (1995)
Numata, K. 等人:“由嗜热基因和嗜温基因构建的嵌合异丙基苹果酸脱氢酶基因的热稳定性。”
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yamagishi, A. et al: "″Chemical Evolution: Self-Organization of the Macromolecules of Life″" Deepak Publishing,337 (1995)
Yamagishi, A. 等人:““化学进化:生命大分子的自组织”” Deepak Publishing,337 (1995)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Yasuda, M. et al: "The plasmid found in isolates of the acidothermophilic archaebacterium, Theymoplasma acidophilum." FEMS Microbiel. Lett. 128. 157-162 (1995)
Yasuda, M. 等人:“在嗜酸嗜热古细菌分离株中发现的质粒,嗜酸热原体。”
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  • 发表时间:
  • 期刊:
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    0
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  • 作者:
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2007
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