癌遺伝子mafの標的遺伝子

癌基因maf的靶基因

基本信息

批准号：
07272202
负责人：
酒井正春
金额：
$ 2.11万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

トリ肉腫ウイルスAS42より見いだされた癌遺伝子mafは転写因子をコードしており、その産物はJunとよく似た結合配列を認識し二量体で結合する.b-Zip構造を持つ他の転写因子ともヘテロ二量体を形成して転写を活性化する.ラット肝発癌過程の初期から特異的に発現されるGST-P遺伝子にMaf結合配列が存在することからラットより2つのmaf関連遺伝子をクローンし、GST-P遺伝子の発現にどのように関与するのか、標的遺伝子は何かを探索する目的でそれらの性質と発現を調べた.ラットから得られたmaf1, maf2産物の結合配列の決定を行うとMaf1はv-Mafで決定された配列よりも短い配列、-GCTGAC-と類似の配列が多く得られ、Maf2は-TGA/CC-およびやや結合活性の弱い類似の配列が得られた.Jun, Fos関連因子とのヘテロ二量体結合はv-MafがすべてのJun, Fos関連因子とヘテロ二量体を形成するのに比べ、Maf1はJun関連因子とは結合せず、Fos関連因子と二量体を作る.Maf2はFra2とは結合するが、ほかのJun及びFos関連因子と結合しない.これらのことからMaf1がMaf2に比べ多くの標的遺伝子を活性化し得る事が示唆された.15日目のラット胎児のin situハイブリダイゼーションを行った結果、手足、椎体等の軟骨、脊髄、目に強い発現が見られた.2つの遺伝子の発現は似ているが脊髄ではより内側の層にmaf1、やや外側の層にmaf2の発現が見られた.目の発現は水晶体に限局しており、maf2がより高く発現している.これらの結果、両遺伝子とも分化段階の極めて限られた時期に発現が見られ、軟骨、脊髄、水晶体等の細胞分化に重要な働きをしていることが示唆される.GST-Pとmafの発現は相関せずGST-Pの肝癌初期の発現への直接の関与は考えにくい.しかし、肝癌細胞の核抽出液にMafの結合配列DNAへの結合活性が存在し、ドミナントネガテイブ作用を持つと考えられるsmall maf遺伝子を細胞に導入するとGST-P遺伝子の発現が強く抑えられることなどからMafに関連する転写因子の存在が強く示唆された.

在鸟类肉瘤病毒AS42中发现的Oncogene MAF编码转录因子，其产物识别类似于JUN的结合序列，并与二聚体结合。它还具有带有B-ZIP结构的其他转录因子的异二聚体，以激活转录。由于GST-P基因中的MAF结合序列的存在，该序列是从大鼠肝癌发生的早期阶段特别表达的，因此从大鼠中克隆了两个与MAF相关的基因，并研究了靶基因的性质和表达以探索靶基因是什么。从大鼠获得的MAF1，在确定MAF2产物的结合序列时，MAF1的序列比通过V-MAF确定的序列短，并且发现与-gctgac-更相似的序列，并且MAF2的结合序列具有相似的序列，具有较弱的结合活性。与具有所有JUN和FOS相关因素的V-MAF形成异二聚体相比，与JUN和FOS相关的因子的异二聚体结合，MAF1与与JUN相关的因素没有结合，并与与FOS相关的因素产生二聚体。 MAF2与FRA2结合，但不与其他JUN和FOS相关的因素结合。这些表明MAF1比MAF2可以激活更多的靶基因。在第15天的大鼠胎儿中，原位杂交的结果表现出强烈的软骨，脊髓和眼睛在四肢，椎体等中的表达。这两个基因的表达相似，但是在脊髓的内层中观察到MAF1，并且在较小的外层中观察到MAF2。眼睛的表达位于镜头上，MAF2的表达更高。这些结果表明，这两个基因在分化的时期非常有限，这表明它们在软骨，脊髓，镜头等中细胞分化中起重要作用。GST-P和MAF的表达与GST-P的早期表达无关，并且与GST-P的早期表达无关。然而，肝癌细胞的核提取物与MAF结合序列的DNA具有结合活性，并且被认为具有显着的负面影响。强烈提出了与MAF相关的转录因子的存在，因为将MAF基因引入细胞中强烈抑制了GST-P基因的表达。