ポリ(ADP・リボース)合成阻害剤による癌遺伝子排除の分子機構とその応用

聚(ADP/核糖)合成抑制剂消除癌基因的分子机制及其应用

• 批准号: 07274235
• 负责人: 上田 國寛
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07274235/
• 关键词: ポリ(ADP-リボース)シンテターゼ; テトラカルシノーマ細胞; 阻害剤; 分化誘導; all-transレチノイン酸; 自己修飾; NAD; アポトーシス

(1)ポリ(ADP-リボース)シンテターゼ阻害剤による癌細胞の分化誘導-前年度、テラトカルシノーマEC細胞の培養系にベスナリノンやPhIP(ヘテロサイクリックアミンのひとつ)などの弱いポリ(ADP-リボース)シンテターゼ阻害剤を与えると、分化誘導できることを示したが、その後、この分化がこの種の細胞で稀な神経系中心であることを見出した。(2)癌細胞の分化誘導過程におけるポリ(ADP-リボース)代謝の解析-テラトカルシノーマ細胞を誘導剤all-transレチノイン酸で分化させる際、ごく初期にポリ(ADP-リボース)合成の一過性亢進がみられることを前年報告したが、その後、この亢進がシンテターゼの自己修飾によることを見出した。また、この一過性亢進に伴い、細胞内NAD濃度の著明な減少を観察した。(3)癌細胞の分化に伴うポリ(ADP-リボース)シンテターゼの分解-テトラカルシノーマ細胞をall-transレチノイン酸で分化誘導させる上記の系において、ポリ(ADP-リボース)シンテターゼの挙動をウエスタンブロット法で解析した結果、自己修飾したシンテターゼ(115Kb)が速やかに限定分解を受け、85〜90Kbの断片(アポトーシスに特徴的とされる分解産物)を生じることを見出した。癌細胞の分化誘導によるアポトーシスの誘導-テラトカルシノーマ細胞をベスナリノンやPhIP、あるいはall-transレチノイン酸で分化誘導させる際、必ず一方で核凝縮の特徴なアポトーシス細胞を大量に生じることが明らかとなった。(5)代謝標識法によるポリ(ADP-リボース)アクセプターの解析-培養細胞に^3H-アデノシンなどの標識前駆体を与え、in vivoで代謝系を介してポリ(ADP-リボシル)化蛋白質を標識する系を構築した。この解析から、内因性アクセプターとして、ポリ(ADP-リボース)シンテターゼとヒストン以外に、数種の蛋白質バンドを分離することに成功した。

(1)Differentiation induction of cancer cells in culture line of EC cells in previous year, early stage and early stage. (2)ADP metabolism analysis in differentiation induction of cancer cells. ADP synthesis transient hyperactivity during differentiation, early hyperactivity, and early hyperactivity. The transient hyperactivity of NAD was accompanied by a significant decrease in intracellular NAD concentration. (3)Differentiation of Cancer Cells (ADP-free)-free-cell differentiation-free-cell differentiation (ADP-15 Kb)-115Kb)-15) The induction of differentiation of cancer cells in the induction of nuclear condensation characteristics of cancer cells in the induction of differentiation of cancer cells. (5)Metabolic labeling method: analysis of ADP-labeled proteins in cultured cells; construction of a metabolic system for ADP-labeled proteins in vivo The analysis of the protein was successful in the separation of several proteins.

项目成果

Kawamata,J.: "Detection of superoxide dismutase-1 gene resulting in frame-shift mutation in a patient with familial amyotrophic lateral sclerosis." Human Mut.(in press). (1996)

Kawamata, J.：“检测超氧化物歧化酶 1 基因导致家族性肌萎缩侧索硬化症患者发生移码突变。”

Ueda,K.,et al.: "Inhibitors of mono ADP-ribosyltransferase." Springer Verlag (in press), (1996)

Ueda,K.,et al.：“单 ADP-核糖基转移酶抑制剂”。

Ueda,K.,et al.: "Cell differentiation induced by poly (ADP:ribose) synthetase inhibitors." Biochimie. 77. 369-373 (1995)

Ueda,K.,et al.：“聚（ADP：核糖）合成酶抑制剂诱导细胞分化。”

Kido,T.,et al.: "Western blotting for specific detection of active from of protease." Clin.Chim.Acta. 237. 31-41 (1995)

Kido,T.,et al.：“用于特异性检测蛋白酶活性的蛋白质印迹。”

木戸隆宏ほか: "ポリ(ADP-リボシル)化阻害剤による細胞分化の誘導" 生化学. 67. 904 (1995)

Takahiro Kido 等人：“聚（ADP-核糖基）化抑制剂诱导细胞分化”生物化学 67. 904（1995）。