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小脳の機能発達に関わる機能分子の分子神経生物学的研究

参与小脑功能发育的功能分子的分子神经生物学研究

基本信息

批准号：
07279210
负责人：
古市貞一
金额：
$ 1.47万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.小脳の機能発達期に特異的な分子の遺伝子発現をディファレンシャル・ディスプレイ法で体系的に探索した。胎性(E)18、生後(P)0、P3、P7、P12、P15、P21、成獣(A)の小脳RNAから機能発達ステージに沿って特有な発現パターンを示すPCR産物が得られた(現在23種)。これらの中には発達とともに発現が上昇するもの、逆に減少するもの、特定のステージのみ発現するものなどに分類できた。2.小脳では、神経入力に起因する矢状断方向に帯状の機能モジュールが存在することや、ある種の蛋白質や糖などが矢状断方向に帯状に限定発現することが知られており、以前から両者の関連性が示唆されてきた。今回、発達期の小脳での帯状遺伝子発現をβ-galactosidase(β-gal)活性のX-gal染色で観察出来るトランスジェニックマウス系統を樹立した。この帯状染色はプルキンエ細胞の特定サブセットに限定されたβ-gal発現に起因し、E17から観察され、P10には消失する(即ちすべてのプルキンエ細胞で発現ONになる)。P0小脳を多孔膜に静置してin vitro器官培養すると、脊髄や下オリーブ核などからの投射がなくなるが、培養開始後10日を過ぎても帯状発現が観察された。培地にK^+(30mM)、tetrodotoxin(1μM)、bicuculline(10μM)を添加しても帯状発現は消失しなかった。P10頃の小脳皮質では顆粒細胞の増殖と細胞移動があり、平行線維とプルキンエ細胞でのシナプス形成も起きる。しかし、顆粒細胞が変性脱落する遺伝性小脳変性症マウスweaverとの交配系統の小脳でも帯状発現はプログラムどうり消失した。今回の解析では、(1)E17までにはβ-gal発現のON細胞とOFF細胞のサブセットが矢状断方向に帯状にプルキンエ細胞層に並ぶことが既に決定されている、(2)P10頃までにすべてON細胞となるシグナル(小脳外から?)が必要である、(3)このOFFからON細胞への転換は単純な電気活動や顆粒細胞からの誘導ではない、ことが示唆された。

1. The microphone is able to make special use of the information technology to realize the exploration of the system. Fetal (E) 18, postnatal (P) 0, P3, P7, P12, P15, P21, and adult (A) small RNA machines were able to detect the presence of PCR products (now 23). In recent years, there are many problems in the system, such as the situation, the situation and the situation. two。 The cause of the disease is that the sagittal direction is broken in the sagittal direction, and that the sugar in the sagittal direction is limited in the sagittal direction, and that the previous partner's connection shows that the symptoms are abnormal. This time, during this period, the β-galactosidase (β-gal) activity was detected by X-gal staining and the system was isolated. The cells were stained in a specific way, and the cause of β-gal was limited, E17 was detected, and P10 was disappeared (i.e., ON was detected in cells). The porous membrane of P0 was placed in the in vitro organ culture device, the spinal cord was placed in the lower part of the cell, and the tissue culture was detected 10 days after the start of the culture. Peidi K^ + (30mM), tetrodotoxin (1 μ M), bicuculline (10 μ M) add the shape of the cups to disappear. The cells of P10 microsomia were transferred by cell transfer, and the cell cycle was formed by the formation of cell cycle. In the mating system of the mating system, it was found that there was a loss of gonadotropia in the mating system in the form of microcysts. This time, (1) E17