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小脳の機能発達に関わる機能分子の分子神経生物学的研究

参与小脑功能发育的功能分子的分子神经生物学研究

基本信息

批准号：
08271209
负责人：
古市貞一
金额：
$ 1.09万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.小脳皮質の神経回路網は多数の傍矢状断方向の「微小帯域」に区分され、これらと対応する前庭核や小脳核とともに小脳の機能単位を構成すると考えられている。しかし、この様な機能モジュールが如何にして機能発達するのかについては謎である。我々は、小脳がストライプ状にX-gal染色されるlacZ遺伝子発現トランスジェニックマウス系統を樹立した。このストライプは、傍矢状断方向に帯状に分布する(parasagittal zone)特定のプルキンエ細胞(PC)サブセットのみでlacZ発現がONになるために起こるもので、機能モジュールを構成するPCの遺伝子発現の特性を反映していると考えられる。この遺伝子発現の不均一さは胎生期のPCに既に内在性する特性で、早くからゾーンを構成していることが明らかとなった。ストライプは正中で左右対称の対のゾーン群から構成される。同じゾーン内における発現PCの密度と個々のPCの発現レベルはほぼ同じであるが、発現PCのゾーン内での位置には局在パターンの傾向はあるものの厳密さはない。従って、遺伝子発現はゾーン内における発現PC数(正確には密度)として全体的に調節されており、ゾーン内における個々の発現PCの位置としての厳密な調節はないらしい。これらのことから、胎生から生後発達期にかけて発生するPCサブセットにおける遺伝子発現のゾーン形成は、小脳の機能モジュールの発達の制御と何らかの関係が示唆される。2.マウス小脳の神経回路の機能発達の分子メカニズムには不明な点が多い。これらに関わる機能分子を探索するため、マウス小脳の生後発達期の各ステージ(E18、P0、P3、P7、P12、P15、P21、adult)でDifferential Display法によるRT-PCRを行った。約2500種類のPCR産物の解析から、各ステージ(early、middle、late)に特徴的な発現パターンを示す135種類の遺伝子を検出した。さらにNorthern blot hybridizationやRT-PCR解析をすることで、小脳の機能発達のタイムテーブルに沿ってカタログ化した。これまでに塩基配列を決定した27種類のうち、13種類はDNA databankに登録された既知のものであったが、残りの14種類は未登録のものであった。現在、未登録の全長のcDNAクローニング解析と、まだ塩基配列を決定していないものの解析を進めている。

1. Most of the neural network of the cerebellum is divided into "micro-zones" in the sagittal direction, and the functional units of the vestibular nucleus and the cerebellum are examined. How does this function develop? How does this function develop? We have established a system for the development of X-gal staining in the form of a small number of samples. The characteristics of PC gene expression are reflected in the parasittal zone, which is a specific region of PC cells. The uneven development of these genes is characterized by the intrinsic nature of the PC in the prenatal period, the early development of the PC, and the early development of the PC. The right and left sides of the column are opposite to each other. The density of the PC in the same group, the density of the PC in the same group, and the density of the PC in the same group. The number of PC's (correct density) and the position of PC's (correct density) are adjusted in the whole process. The relationship between the development and control of the development of PC servers and the development of the offspring is shown in the following aspects: 2. The molecular structure of the functional development of the small nervous circuit is unknown. The Differential Display method was used to explore the functional molecules in the postnatal development period of different stages (E18, P0, P3, P7, P12, P15, P21, adult). About 2500 PCR products were analyzed, and 135 PCR products were identified for each category (early, middle, late). Northern blot hybridization and RT-PCR analysis were used to detect the presence of DNA in the genome. 27 species of DNA were identified and 13 species of DNA were not identified in the database. Now, the analysis of the unregistered full-length cDNA library and the determination of the nucleotide sequence are in progress.