小脳の分子構築にかかわる新規遺伝子群のポストゲノム的解析

参与小脑分子结构的新基因组的后基因组分析

• 批准号: 13202071
• 负责人: 古市 貞一
• 金额: $ 3.46万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13202071/
• 关键词: 小脳; 発生・分化; 遺伝子発現; プロテオーム; マイクロアレイ; 蛍光ディファレンシャルディスプレイ; Gene Chip

本研究では、マウス小脳の分子構築を解明するため、ゲノムワイドなアプローチによりマウス小脳形成に特異的な遺伝子の体系化を行い、小脳形成にかかわる新規遺伝子の探索とその構造・機能の解析を行った。本年度は、蛍光ディファレンシャル・ディスプレイ法(FDD法)やcDNAマクロアレイ法などによって、マウス小脳形成期に特異的に発現する遺伝子群の探索を行った。現在までにFDD反応物を約12,000個解析して(理研ゲノム・服部先生との共同研究)、発達ステージ特異的な遺伝子を約2,000個クローニングした。さらにAffymetrix社製GeneChipを用いて、小脳形成に特異的な遺伝子を約800抽出することにも成功した。単離した小脳形成に特異的な遺伝子群の発現プロファイルをRT-PCR法によりさらに解析し、遺伝子発現タイムテーブルの作製を行った。今後はin situ hybridization(ISH)法による遺伝子発現ブレインマップの作製をめざす。また、オリゴキャップ法で作製した小脳発達期特異的な完全長cDNAライブラリー(東大医科研・菅野先生との共同研究)を用いて、新規遺伝子のクローニングとその構造、機能、発現の解析を行う。これらの遺伝子産物に対する特異抗体を作製して、たんぱく質機能を解析する。さらに、小脳形成遺伝子(約2,400)を用いて、脳形成遺伝子マイクロアレイの作製とその応用を行う。

In this study, the molecular architecture of small molecules was clarified, and the structure and function of small molecules were analyzed. This year, we will explore the specific gene groups in the development stage of cDNA by FDD method. At present, there are about 12,000 analytical documents for FDD anti-virus (joint research by Mr. Hattori) and about 2,000 analytical documents for developing special information. Affytrix Corporation GeneChip was successfully used to form a unique chip about 800 times. The development of a unique gene cluster in the formation of a single cell was analyzed by RT-PCR and the production of a gene cluster was carried out. In the future, the in situ hybridization(ISH) method will be used to develop new technologies. The structure, function, and development of a complete long cDNA library with unique development stage (joint research by Dr. Kanno and Dr. Kanno of Tokyo University Medical University) were analyzed using the new cDNA library. The specific antibody against this gene product is produced and analyzed. In the meantime, the small formation of the seed (about 2,400) is used in the middle of the formation of the seed, the formation of the seed is used in the production of the seed.

项目成果

中村 浩: "小脳の生後発達を導くトランスクリプトーム機構 生体の科学 第52巻"財団法人金原一郎記念医学医療振興財団/医学書院. 7 (2001)

Hiroshi Nakamura：“指导小脑产后发育的转录组机制。生物体科学，第 52 卷”金原一郎医疗促进纪念基金会/Igaku Shoin 7 (2001)。

Kagami, Y.: "Investigation of differentiaily expressed genes during the development of mouse cerebellum"Brain Research Gene Expression Patterns. 1. 39-59 (2001)

Kagami, Y.：“小鼠小脑发育过程中差异表达基因的调查”脑研究基因表达模式。

Iwasaki, H.: "Molecular characterization of the Starfish IP3 receptor an its role during oocyte maturation and Fertilization"J. Biol. Chem.. (in press). (2002)

Iwasaki, H.：“海星 IP3 受体的分子特征及其在卵母细胞成熟和受精过程中的作用”J.

Uchiyama, T: "A novel recombinant hyper-affinity lnositol 1,4,5-trisphosphate (IP3) absorbent traps IP3, resulting in specific inhibition of IP3-mediated calcium signaling"J. Biol. Chem.. (in press). (2002)

Uchiyama, T：“一种新型重组超亲和力肌醇 1,4,5-三磷酸 (IP3) 吸收剂捕获 IP3，从而特异性抑制 IP3 介导的钙信号传导”J.

吉川文生: "哺乳類脳の形成と遺伝子 日本生化学会 バイオサイエンスの新世紀 第11巻 脳の発生・分化・可塑性"共立出版(印刷中). (2002)

Fumio Yoshikawa：“哺乳动物大脑形成和基因，日本生物化学学会，生物科学新世纪，第 11 卷：大脑发育、分化和可塑性”，Kyoritsu Shuppan（印刷中）。