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転写開始期の動的シグナル認識

转录起始过程中的动态信号识别

基本信息

批准号：
08260221
负责人：
嶋本伸雄
金额：
$ 1.54万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

全生物の転写において、RNAポリメラーゼがDNA上のプロモーターに結合した後に、短鎖RNAの合成・解離が起こるが、その原因は未知であった。申請者らは、短鎖RNAの合成・解離をおこなう新種の転写複合体(Moribund Complex)と、従来の直列モデルと異なる新しい反応機構とをλPRプロモーターからの転写で見出した。この現象は転写開始調節を統一的に理解できる基盤になるとともにσ因子の解離、RNA切断因子の作用機構という転写開始期の大きな問題の解決の可能性をもつ。短鎖RNAの生成が減少する、転写開始因子σ70に変異(S506F,P504L)を持つ変異RNAポリメラーゼと、T7A1プロモーターからの転写を検討し、提案された新しいモデルの普遍性を検討した。この結果、変異ポリメラーゼを用いた場合でもT7A1転写の場合でもいずれもMoribund Complexの解離の加速により、Moribund Complexの蓄積が少なくなることが明らかになり、新しいモデルの有効性が証明された。また、蛋白質の非特異的吸着が少ない樹脂の合成に成功し、これを用いて固定化したDNAカラム上で転写をおこない、Processive ComplexとMoribund Complexを分離し、OHラジカル法でタンパク質フットプリント法を行い、二つの複合体においてσ70のコンフォーメーションが異なっていることが明らかになった。IEEE Trans IAの論文について、米国応用電気電子学会より、ジェームズメルヒャ-賞を授与された。1996年藤原賞を授与された。

The whole organism is composed of DNA, RNA, RNA. The applicant has identified a new type of Moribund Complex for short chain RNA synthesis and dissociation, and a new type of reverse transcription mechanism for short chain RNA synthesis and dissociation. The mechanism of action of σ factor and RNA cutting factor in the initial period of writing and the possibility of solving the problem Short lock RNA generation is reduced, write start factor σ70 is changed (S506F, P504L), different RNA types are changed, T7A1 is changed, write start factor σ 70 is changed, and new types of short lock RNA are changed. The results show that the decomposition of Moribund Complex is accelerated and the accumulation of Moribund Complex is reduced. In addition, non-specific adsorption of protein was successfully carried out in the synthesis of small resin, which was immobilized on the DNA matrix, separated from the Processive Complex and Moribund Complex, and carried out in the OH matrix method. IEEE Trans IA papers are published in the American Institute of Electrical Electronics. In 1996, Fujiwara was awarded the title and awarded the title.