大腸菌SSBレギュロンと増殖環境

大肠杆菌SSB调节子和生长环境

• 批准号: 01655505
• 负责人: 嶋本 伸雄
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1989
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1989 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-01655505/
• 关键词: 一本鎖DNA結合蛋白質; 大腸菌SSB; 増殖調節; 翻訳調節; 翻訳レギュロン

大腸菌は、与えられた環境のもとで、その増殖能力によって淘汰されてきており、効率のよい増殖調節機構を備えているはずである。複製、転写、翻訳各系の間に存在する調節機構は、状況証拠は見いだされてきたが、確実なものはまだ見いだされていない、大腸菌一本鎖DNA結合蛋白質(SSB)は、大腸菌の複製、修復に関与している蛋白質である。SSBはDNAの一本鎖部分に結合し蛋白クラスタ-を形成する。この複合体がRNAプライマ-合成のための鋳型となり、また、修復や組み換えを促進する構造だと考えられている。申請者は、in vitroでSSBが一群のmRNAに特異的に結合して、翻訳を阻害することを見いだした。細胞内でもこの機構が働くならば、増殖速度、つまり、複製速度が大きいときには、SSBは複製系で消費され、翻訳は阻害されないことが予想される。一方、複製速度が遅いときには、翻訳が阻害される一群のオペロン(SSB翻訳レギュロン)があるはずでる。すでに、in vitroの証拠は得られているので、本研究の目的は、SSB翻訳レギュロンには、どのような遺伝子があるのか、複製と翻訳のSSBによる共役をin vivoで証明することである。本年度は、in vivoでの遊離SSBの量が変化させられるように、発現プロモ-タ-を持つがSSB結合部位を欠失させたSSB遺伝子を持つプラスミドを調製した。このようなプラスミドをもつ大腸菌は、SSBを発現させると死滅したことから、細胞内の遊離SSBは有害であり遊離SSBは調節を受けていることが推定できる。二次元ゲル電気泳動によって、in vivoでのSSB量の変化にともなって発現が変化する蛋白質が最低6種類存在することが明らかになった。この遺伝子の同定が終わりしだい、報告をまとめる予定である。

Coliform bacteria are resistant to environmental factors, and their ability to reproduce is not limited to elimination, but rather to reproduction regulation. The regulatory mechanisms involved in replication, transcription and translation of E. coli DNA binding protein (SSB) are identified in the presence of DNA binding protein (SSB) in E. coli DNA. SSB is a DNA fragment that binds to a protein. The complex is composed of RNA, DNA and DNA. The applicant is in vitro with a group of mRNA specific binding sites, which are resistant to translation. Intracellular mechanisms vary in size, propagation speed, replication speed, SSB replication system consumption, inversion resistance, etc. A group of people who copy at different speeds (SSB) and who copy at different speeds. The purpose of this study is to prove that SSB replication can be achieved in vivo. This year, the amount of free SSB in vivo has decreased, and the amount of SSB binding sites has decreased. This is the first time that free SSB has been detected in cells. The minimum number of protein species present in the protein is 6. This is the first time I've ever seen a woman.