アンチセンスATM遺伝子治療による放射線増感効果

反义ATM基因治疗的放射增敏作用

• 批准号: 08266208
• 负责人: 細井 義夫
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266208/
• 关键词: ATM; AT; 放射線; アンチセンス; 毛細血管拡張性運動失調症

ヒトの放射線高感受性遺伝病である、毛細血管拡張性運動失調症(ataxia telengiectasia、 AT)の原因遺伝子ATMの発現や活性を修飾することにより、癌細胞の放射線感受性を高めることが可能かどうかを確かめるたもの基礎的実験を行った。まず臨床的に放射線抵抗性であることが知られている悪性脳腫瘍において、ATMのRNA量がどのように変化しているかを調べた。Glioblastoma4例、Astrocytoma grade III4例、Astrocytoma grade II例について検討を加えた。手術標本よりtotal RNAをAGPCにより調整し、RT-PCR法により半定量した。その結果、Gliobalstomaでは4例中1例で、Astrocytoma gradeIIIでは4例中3例でATMのRNAが正常脳に比較して増大していた。ATMの異常をヘテロに持つ人由来の細胞は、正常細胞に比べ放射線高感度感受性であるという報告がある。従って、放射線感受性とATM遺伝子産物量との間に相関関係が認められる可能性がsる。このため、放射線抵抗性癌でATMの発現が高いとしたならべ、それが放射線感受性と関係しているかどうかを検討する必要が考えられる。次にアンチセンスとセンスATMが癌細胞の放射線感受性に及びす影響を検討した。アンチセンス、センスATMは転写開始部位より22baseの長さで作成した。投与量は20μMとなるように1日3回投与した。投与は4日間行い、投与開始より3日間に放射線を照射した。使用した細胞は、培養脳腫瘍細胞T98Gを用いた。その結果、このプロトコールは細胞毒性がみとめられ、た。また、放射線感受性に関しては、アンチセンスATMの投与によりT98Gの放射線感受性は高められたが、センスATMの投与によっても放射線感受性は高くなった。これは毒性によるためだと考えられるが、投与量を変更することが必要だと考えられた。

我们进行了基本实验，以确定基因ATM的表达和活性是否可以提高癌细胞的辐射敏感性。首先，我们研究了ATM RNA的水平如何变化恶性脑肿瘤，这些脑肿瘤在临床上是放射耐药的。研究了四例胶质母细胞瘤，四例星形胶质细胞瘤III级和星形胶质细胞瘤II级。使用AGPC从手术标本中调整总RNA，并通过RT-PCR半定量。结果，与正常的大脑相比，在胶质细胞瘤III级的4例中，有4例中有1例中有1例中增加了ATM RNA。据报道，与正常细胞相比，具有异源ATM异常的人类衍生细胞对辐射更敏感。因此，可以观察到辐射灵敏度与ATM基因产物量之间的相关性。因此，人们认为ATM的表达在抗辐射癌中很高，是否应研究与辐射敏感性有关。接下来，研究了反义和ATM ATM对癌细胞辐射敏感性的影响。反义和感官自动取款机是从转录启动位点的22个基部创建的。剂量每天三次给药，为20μm。给药了四天，在给药开始后三天内辐射辐射。所使用的细胞是培养的脑肿瘤细胞T98G。结果，发现该方案是细胞毒性的。此外，关于辐射敏感性，通过施用反义ATM，也可以通过施用理解ATM来提高T98G辐射灵敏度。人们认为这是由于毒性引起的，但是人们认为需要改变剂量。