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転写開始期の動的シグナル認識

转录起始过程中的动态信号识别

基本信息

批准号：
08260221
负责人：
嶋本伸雄
金额：
$ 1.54万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

全生物の転写において、RNAポリメラーゼがDNA上のプロモーターに結合した後に、短鎖RNAの合成・解離が起こるが、その原因は未知であった。申請者らは、短鎖RNAの合成・解離をおこなう新種の転写複合体(Moribund Complex)と、従来の直列モデルと異なる新しい反応機構とをλPRプロモーターからの転写で見出した。この現象は転写開始調節を統一的に理解できる基盤になるとともにσ因子の解離、RNA切断因子の作用機構という転写開始期の大きな問題の解決の可能性をもつ。短鎖RNAの生成が減少する、転写開始因子σ70に変異(S506F,P504L)を持つ変異RNAポリメラーゼと、T7A1プロモーターからの転写を検討し、提案された新しいモデルの普遍性を検討した。この結果、変異ポリメラーゼを用いた場合でもT7A1転写の場合でもいずれもMoribund Complexの解離の加速により、Moribund Complexの蓄積が少なくなることが明らかになり、新しいモデルの有効性が証明された。また、蛋白質の非特異的吸着が少ない樹脂の合成に成功し、これを用いて固定化したDNAカラム上で転写をおこない、Processive ComplexとMoribund Complexを分離し、OHラジカル法でタンパク質フットプリント法を行い、二つの複合体においてσ70のコンフォーメーションが異なっていることが明らかになった。IEEE Trans IAの論文について、米国応用電気電子学会より、ジェームズメルヒャ-賞を授与された。1996年藤原賞を授与された。

All biological の planning write において, RNA ポリメラーゼが DNA のプロモーターに combining したに, after short がの lock RNA synthesis, dissociation こるが, そはの reasons unknown であった. Applicants らは, short の lock RNA synthesis, dissociation をおこなう new species の planning to write Complex (Moribund Complex) と, 従の inline モデルと different なる new しいと応 authorities を lambda PR プロモーターからの planning で see write a した. この phenomenon は planning to write start regulating を unified に understand できる base plate になるとともに sigma factor の dissociation, RNA cut-off factor の role institutions という planning write start period の big きなの solve の possibility をもつ. Short RNA lock の generated が reduce する, planning to write start factor sigma 70 に - vision (S506F P504L) を hold つ - different RNA ポリメラーゼと, T7A1 プロモーターからの planning write を beg し検, proposal された new しいモデルの universality を beg し検た. この results, - different ポリメラーゼを with いた occasions でも T7A1 planning write の occasions でもいずれも Moribund Complex のの dissociation accelerated により, Moribund Complex の accumulation が less なくなることが Ming らかになり, new しいモデルの have sharper sex が prove された. また, protein の sorption of nonspecific が less なのい resin synthesis にし success, これを with いて immobilized した DNA カラムで on planning write をおこない, Processive Complex と Moribund Complex を separation し, OH ラジカル method でタンパク qualitative フットプリント method をい, two つの Complex において sigma 70 のコンフォーメーションが different なっていることが Ming らかになった. IEEE Trans IA の paper について, 応気 electronic electricity meters countries learn より, ジェームズメルヒャ - reward を grant された. In 1996, the Fujiwara Prize was awarded to を and された.