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リボサイムを用いた腫瘍細胞上補体制御膜因子の不活化による免疫原性の増強

使用核糖酶灭活肿瘤细胞上的补体调节膜因子来增强免疫原性

基本信息

批准号：
08266259
负责人：
岡田則子
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08266259/
关键词：
リボザイム 5I2抗原補体制御膜因子腫瘍細胞 DAF MCP 補体反応

项目摘要

1。ラットの種特異的補体制御膜因子である5I2抗原を発見し、そのcDNAもクローニングすることができたので、腫瘍細胞膜上への5I2抗原の発現を抑制し、自己(同種)補体の反応を許すようにさせる方法して、5I2抗原の遺伝子を特異的に攻撃するリボザイムの開発を試みた。5I2抗原のcDNAの塩基配列を解析し、ハンマーヘッド型のリボザイムの標的とするのに適当と考えられる塩基配列を探索した。それに基づきリボザイムの合成を行った。5I2抗原cDNAのin vitro transcriptを作り、このリボザイムを作用させたところtranscriptのmRNAを特異的に切断することが確かめられた。2。マウスのDAF (decay accelerating factor)のcDNAもクローニングすることができたので、発現組織についての検討を行ったが、精巣に強い発現が認められた。モルモットのMCP (membrane cofactor protein)のcDNAもクローニングし、その発現組織を検討したが、この場合には、より強い精巣への限局が認められた。一方、マウスの腫瘍細胞を用いて解析するため、マウスの強力な補体制御膜因子であるCnyに対するモノクローナル抗体を用いて腫瘍細胞膜上のCrryの機能をブロックしたときの補体反応性の解析を行った。その結果、Crryをブロックするだけでは不十分で、腫瘍細胞に対するIgM抗体などの反応を起こさせると強い補体反応を起こし、C3の沈着等を起こせることが分かった。3。5I2抗原リボザイムは、in vitroのtranscriptを特異的に切断するので腫瘍細胞の細胞内で作用させて、5I2抗原蛋白の細胞膜への発現をどの程度まで抑制するかを検討中である。

1. Raton species-specific complement membrane factor である5I2 antigen を発见し, そのcD NAもクローニングすることができたので, への5I2 antibody on the tumor cell membrane The method of suppressing the appearance of the original disease and suppressing the reaction of one's own (same species) complementて, 5I2 antigen specific にattack するリボザイムの开発をtest みた. 5I2 antigen cDNA base alignment analysis, ハンマーヘッド type analysis The とするのにとするのにボザイムの名とらられる塩base arrangement をExploration した.それに记づきリボザイムの合を行った. 5I2 antigen cDNA in vitro transcript をり, このリボザイムを effect させたところtranscript のmRNA をspecific に cutting することが正かめられた. 2.マウスのDAF (decay accelerating factor)のcDNAもクローニングすることができたので, The organization is now organized and organized, and the organization is organized, and the organization is strong, and the organization is strong, and the organization is recognized.モルモットのMCP (membrane cofactor protein) のcDNAもクローニングし, その発existing organization を検したが, このoccasion には, よりstrong い精巣へのlimited が cognizance められた. One party, masu's tumor cell を use いて analysis するため, masu's strong な complement membrane factor であるCny に対するモノThe function of クローナルantibody is analyzed by analyzing the function of Crry on the tumor cell membrane and analyzing the complement reaction of クローナルantibody.そのRESULTS、CrryをブロックするだけではNot ten で、Tumor cells に対するIgM antibody などの Reflection を rises こさせると强い anti complement 濜を rises こし, C3 の calmness, etc. を rises こせることが分かった. 3. 5I2 antigen リボザイムは, in It can specifically cut off the intracellular effects of tumor cells in vitro, and suppress the effects of 5I2 antigen protein on the cell membrane.