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細胞外カリウムイオンにより誘導サレル膜電位依存性陽イオンチャネルの解析

细胞外钾离子诱导的沙雷尔膜电压门控阳离子通道分析

基本信息

批准号：
08268226
负责人：
平野丈夫
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

生後15日から20日のマウス小脳より厚さ150μmの切片を切りだし、皮質の顆粒細胞からパッチクランプ法のホールセルモードで膜電流記録を行った。細胞外液のKイオン濃度を3mMより18mMに増加したところ、‐60mVより脱分極した電位で10msec程度の時定数で活性化され、数100msec程度の時定数で不活性化される電流を見い出し、I_<CK>と名づけた。I_<CK>は0mV付近で電流の向きが逆転し、細胞内の陰イオンを大きな有機イオンに置き換えても観察できた。従って、I_<CK>はイオン選択性の弱い陽イオンチャネル電流ではないかと考えられる。なお、実験はNaチャネル・Caチャネル・Kチャネル・グルタミン酸受容体チャネル・GABA受容体チャネルの阻害剤のテドロドトキシン・Cdイオン・Niイオン・細胞内Csイオン・ビキュキュリン・CNQX・AP5等の存在下で行った。I_<CK>は通常の外液中では認められず、高Kイオン外液により誘導されるユニークな電流であり、新規なチャネルがこの電流を通している可能性が考えられる。なお、細胞外液のCaイオンを除き細胞内にEGTAを加えてもI_<CK>は観察できたので、I_<CK>の誘導にはCaイオンは直接的には関与していない。各膜電位より‐80mVに膜電位を変化させた時のTail電流の測定を行い、チャネル活性化の膜電位依存性を計測したところ、I_<CK>は‐50mVより正の電位で活性化し、0mVではほぼ完全に活性化していることが明らかになった。また、I_<CK>の不活性化は内向き電流に依存したものであることも判明した。I_<CK>はKチャネルの阻害剤として知られるTEA・4APによって低濃度でブロックされた。

From the 15th day to the 20th day after birth, the membrane current was recorded in the granular cells of cortex by cutting the sections with a thickness of 150μm. The extracellular K concentration was increased from 3mM to 18mM, and the depolarization potential was increased from-60 mV to 10msec. The depolarization potential was activated from-60 mV. The depolarization potential was activated from-60 mV<CK>. I_<CK>0mV near the direction of the current is reversed, the cell is negative, the organic is negative, and the detection is negative. The current generation of the current generation is not only weak but also weak<CK>. In the presence of Na, Ca, K, GABA, GABA, The <CK>possibility of current conduction in the normal external fluid is examined. In addition, the extracellular Ca ~(2 +) and intracellular EGTA <CK><CK>can be detected and induced directly by Ca ~(2 +). Measurement of Tail Current at the Time of Membrane Potential Change of-80 mV and Measurement of Membrane Potential Dependence of Activation at the Time of Membrane Potential Change of<CK>-50 mV and Activation at the Time of Membrane Potential Change of 0mV I'm not active. I<CK>'m not active. I'm active. I<CK>_K

项目成果

期刊论文数量（6）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Kadotani,H.,Hirano,T.,Masugi,M.,Nakamura,K.,Nakao,K.,Katsuki,M.,and Nakanishi,S.: "Motor discoordination results from combined gene disruption of the NR2A and NR2C subunits,but not from single disruption of the NR2A or NR2C subunit." J.Neurosci.16. 7859‐7

Kadotani, H.、Hirano, T.、Masugi, M.、Nakamura, K.、Nakao, K.、Katsuki, M. 和 Nakanishi, S.：“运动失调是由 NR2A 和 NR2C 亚基的联合基因破坏造成的，但不是来自 NR2A 或 NR2C 亚基的单一破坏。” J. Neurosci.16. 7859‐7