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生殖細胞における染色体テロメアの機能構造の解析

生殖細胞における染色体テロメアの機能構造の解析
生殖细胞染色体端粒功能结构分析
批准号：
08275213
负责人：
石川 冬木
金额：
$1.28万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
1996 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08275213/
关键词：
テロメレースTLP1テトラヒメナp80始原生殖細胞

项目摘要

项目成果

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我々はPCRを応用した高感度かつ定量的なテロメレース活性の検出方法を独自に解析し、テロメレースのDNA合成酵素としてのprocessivityをはじめとする生化学的解析を行ってきた。その結果、非常に高純度のヒトテロメレースを純化精製することに成功した。一方、テトラヒメナ・テロメレースのp80蛋白質配列を用いたデータベースサーチから、最近、テロメレースを構成する蛋白質の一成分のcDNAクローンを世界ではじめて単離することに成功した。このcDNAクローンの構造解析により、約2,800アミノ酸をコードするopen reading frameが同定された。部分的なリコンビナント蛋白質を大腸菌で発現させ、ウサギを用いてポリクローナル抗体を得た。この抗体は、ウエスタンブロッティングおよび免疫沈降により、SDS-PAGE上、約260 kDの分子量に相当する泳動度を示す蛋白質を同定した。蛋白質精製に用いた複数のクロマトグラフィーの画分の検討により、この蛋白質の存在と活性の溶出パターンは完全に一致した。さらに、抗体を用いた免疫沈降物にはテロメレース活性を検出することができた。以上のことより、我々は、クローン化したcDNAは、テロメレースを構成する蛋白質の一つであると結論し、TLP1(telomerase protein 1)と名付けた。次に、熊本大学阿部訓也助教授との共同研究により、マウス初期胚に見られる始原生殖細胞のテロメレース活性を検討するために、アルカリフォスファターゼ-lacZ癒合遺伝子のトランスジェニックマウスより得られた精製始原生殖細胞について検討したところ、意外なことに周囲組織の初期胚細胞よりも低い値を示した。現在、TLP1蛋白質の有無について解析中である。
期刊论文(8)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Ishikawa,F.: "A review article:Telomere crisis,the driving force in cancer cell evolution." Biochem.Biophys.Res.Commun.230. 1-6 (1997)
Ishikawa,F.：“一篇评论文章：端粒危机，癌细胞进化的驱动力。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Tatematsu,K.: "A novel quantitative“stretch PCR assay",that detects a dramatic increase in telomerase activity during the progression of myeloid leukemias." Oncogene. 13. 2265-2274 (1996)
Tatematsu, K.：“一种新颖的定量“延伸 PCR 测定”，可检测骨髓性白血病进展过程中端粒酶活性的显着增加。”Oncogene。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Nakayama,J.: "TLP1:A gene encoding a protein component of mammalian telomerase is a novel member of WD-repeats family." Cell,in press. (1997)
Nakayama, J.：“TLP1：编码哺乳动物端粒酶蛋白质成分的基因是 WD 重复序列家族的新成员。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Ishikawa,F.: "A review article:Telomere crisis in leukemia." Intl.Hematol.in press. (1997)
Ishikawa,F.：“一篇评论文章：白血病的端粒危机。”
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Anti-cancer therapies aiming for cure through inhibiting tumor-specific responses to environmental fluctuation
  • 批准号：
    19H05655
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (S)
  • 资助金额：
    $106.58万
  • 财政年份：
    2019
  • 负责人：
    石川 冬木
  • 依托单位：
    Kyoto University
iPS細胞の品質管理機構
  • 批准号：
    12F02101
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.92万
  • 财政年份：
    2012
  • 负责人：
    石川 冬木
  • 依托单位：
    Kyoto University
がん抑制機構としての細胞老化の分子機構
  • 批准号：
    22240087
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
  • 资助金额：
    $8.65万
  • 财政年份：
    2010
  • 负责人：
    石川 冬木
  • 依托单位：
    Kyoto University
ストレス交差耐性獲得の分子機構
  • 批准号：
    20657033
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 资助金额：
    $1.98万
  • 财政年份：
    2008
  • 负责人：
    石川 冬木
  • 依托单位：
    Kyoto University
海外基金