酵母微小管集合中心の高次機能の解析

酵母微管组装中心的高阶功能分析

• 批准号: 08277205
• 负责人: 大矢 禎一
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08277205/
• 关键词: カルモデュリン; 酵母; 細胞周期

出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)のCa^<2+>結合蛋白質カルモデュリンについて、我々は遺伝学的研究を展開し、標的タンパク質と相互作用する領域のアミノ酸残基の部位特異的変異株の解析を行ってきた。それぞれ遺伝子内で相補する単独の標的タンパク質との結合のみに欠損を持つ変異の単離に成功し、カルモデュリンが少なくとも細胞周期の諸事象に必須な4つの機能を持っていることを証明した。その過程で、カルモデュリンが微小管の集合中心(酵母ではSpindle pole body:以下SPBと呼ぶ)の機能に必須で、染色体分配を制御している事実を掴んだ。今回、我々はSPBの複製と機能に関する新しい変異株をカルモデュリンの変異と合成致死を示す変異として多数単離し、そのような相補性グループの変異のうちで、まず一つの変異(shc2)の表現型を精力的に解析した。PCRを用いたランダムな変異を導入して、温度感受性のshc2変異株を多数取得し、全ての変異位置の決定を行った後で、表現型の解析を徹底的におこなった。shc2の温度感受性変異を解析した結果、SPBの特に内側のinner plaqueと呼ばれる構造が欠落していることを発見した。したがって、この遺伝子産物が明瞭にSPBのinner plaqueの構造維持に関与していることが明らかになった。さらに変異株では、H1キナーゼ活性が低下したままになっていること(G2ブロック)がわかった。したがってSHC2はSPBの特に内側の構造形成に必須であり、shc2の表現型は、何らかのチェックポイントが働いてG2期に増殖を停止していると理解された。

The Ca^<2+> binding protein of Saccharomyces cerevisiae was studied by molecular biology, target protein interaction, and site-specific mutant analysis of acid residues in the field. This is a proof of the importance of maintaining the function of the cell cycle in all aspects of the cell cycle. The function of the Spindle pole body (SPB) is essential for the regulation of chromosome distribution. In this paper, we analyze the phenotypes of SPB related to replication and function, including the diversity of SPB, and the diversity of SPB. When PCR is used, changes are introduced, the majority of temperature-sensitive shc2 variants are obtained, and the location of all changes is determined, so that phenotype analysis can be completed. The temperature sensitivity of shc2 is different from that of SPB, and the structure of SPB is different from that of SPB. The structural maintenance of SPB and inner plaque is related to the structural maintenance of SPB and inner plaque. H1, H2, H3, H4, H5, H6, H7, H8, H9, H SHC2 is the most important component of SPB.

项目成果

Qadota,H.et al.: "Identification of yeast RHO1 GTPase as a regulatory subunit of the 1,3-β-glucan synthase." Science. 272. 279-281 (1996)

Qadota, H. 等人：“鉴定酵母 RHO1 GTP 酶作为 1,3-β-葡聚糖合酶的调节亚基。《科学》272. 279-281 (1996)。

Hirano,H.et al.: "ROM7/BEM4 encodes a novel protein interacting with the Rho1p small GTP-binding protein in Saccharomyces cerevisiae." Mol.Cell Biol.16. 4396-4403 (1996)

Hirano, H. 等人：“ROM7/BEM4 编码一种与酿酒酵母中的 Rho1p 小 GTP 结合蛋白相互作用的新型蛋白。”

Kamada,Y.et al.: "Activation of yeast protein kinase C by Rho1 GTPase." J.Biol.Chem.271. 9193-9196 (1996)

Kamada,Y.et al.：“Rho1 GTPase 激活酵母蛋白激酶 C”。

Kohno,H.et al.: "Bnilp implicated in cytoskeletal control is a putative target of Rho1p small GTP-binding protein in Saccharomyces cerevisiae." EMBO J. 15. 6060-6068 (1996)

Kohno, H. 等人：“与细胞骨架控制有关的 Bnilp 是酿酒酵母中 Rho1p 小 GTP 结合蛋白的假定靶标。”

Inoue,S.B.et al.: "Signaling toward yeast 1,3-β-glucan synthesis." Cell Structure and Function. 21. 395-402 (1996)

Inoue, S.B. 等人：“酵母 1,3-β-葡聚糖合成的信号”。21. 395-402 (1996)