分裂酵母における細胞周期・減数分裂制御機構の研究

裂殖酵母细胞周期及减数分裂调控机制研究

基本信息

批准号：
03J02886
负责人：
島田緑
金额：
$ 2.37万
依托单位：
Nagoya City University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J02886/
关键词：
細胞周期チェックポイント DNA複製分子生物学減数分裂

项目摘要

減数分裂過程では一回のDNA合成の後、相同染色体間で高頻度に遺伝子組み換えが起こり、二回の連続した分裂が行われ、最終的には半減した染色体数を持つ配偶子を形成する。減数第一分裂と第二分裂の間にDNA複製を抑制する制御機構はこれまでのところほとんど分かっていない。そこで、基本的な分子制御機構が保存されており、遺伝学的解析が容易な分裂酵母を用いてこの制御機構を分子レベルで解明することを目的とし、(1)体細胞分裂で再複製を引き起こす条件を減数分裂に導入(2)減数分裂過程で二回以上DNA複製を引き起こす変異株のスクリーニングの二つの方法により解析を行った。方法(1)より、cdc2変異株、cdc13変異株では特殊な条件下において減数分裂過程でDNA複製を二回以上引き起こすことが分かった。方法(2)より、カナマイシン、ウラシルマーカーをゲノムにランダムに組み込んで、変異株ライブラリーを作製し、10変異株を取得に成功した。減数第二分裂後にDNA複製が起きる変異株や減数分裂に入る前にDNA複製が起きる変異株に注目し、変異遺伝子の同定を行った。既知のDNA複製関連の変異株との遺伝学的相互作用についても検討した。

在减数分裂过程中，发生了一种DNA合成，并且在同源染色体之间经常发生遗传修饰，两次连续分裂发生，最终形成染色体计数的配子，将染色体计数减半。迄今为止，在第一和第二减数分裂中抑制DNA复制的调节机制已知。因此，目的是使用裂变酵母在分子水平上阐明这种调节机制，裂变酵母是保守且易于遗传分析的，并使用两种方法进行了分析：（1）引入在体细胞分裂中引入肠细胞增多症中复制的条件，（2）（2）筛选突变体在Meiotic过程中引起DNA的筛选突变体比一次更大。方法（1）表明，在特殊条件下的减数分裂过程中，CDC2和CDC13突变体在减数分裂过程中多次引起DNA复制。从方法（2）中，将卡纳米霉素和尿嘧啶标记随机掺入基因组中以产生突变菌株文库，并成功获得了10个突变菌株。第二次减数分裂和进入减数分裂之前发生的突变体发生后发生的突变菌株集中在重点上，并确定了第二次减数分裂后发生的突变体。还检查了与已知DNA复制相关突变体的遗传相互作用。