Ret蛋白の変異によって生じる多様な臨床病態の解析

Ret蛋白突变引起的各种临床病理分析

• 批准号: 09254222
• 负责人: 浅井 直也
• 金额: $ 2.37万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09254222/
• 关键词: Ret; MEN2型; Hirschsprung病; GDNF; Neurturin; Shc; SH2ドメイン; PTBドメイン

Retは受容体型のチロシンキナーゼをコードし、多発性内分泌腫瘍症(MEN)2A・2B型、Hirschsprung病の原因遺伝子である。リガンドはGDNFで、Retの活性化にはGDNFR-αを必要とする。神経芽細胞腫細胞株を用いて実験を行ったところ、GDNFの添加によるRetの2量体化、ShcとRetとの結合、Shcのリン酸化、ShcとGrb2の結合、GTP結合Rasの増加、MAPキナーゼのリン酸化が検出され、Ret→Shc→Grb2→SosからRas→MAPキナーゼへのシグナルが考えられた。ShcとRetの結合について解析で、MEN2a型変異ではRetはShcのPTBドメインとSH2ドメインの両者へ結合、2B型変異ではPTBのみに結合、GDNFによる活性化ではPTBとSH2の両者に結合した。結合様式の違いが、Shcを介したシグナルに影響を与え、MEN2A型と2B型の病態の違いが生じている可能性が考えられた。GDNFファミリーに属するneurturin(NTN)について、米国のGenentech社と共同研究を行い、NTNによるRetの活性化を明らかにした。活性化にはNTNR-αが必要で、NTN・NTNR-α・Retの複合体により活性化が起きる。また、Retの細胞外領域のカドヘリン様構造について、Caイオンの作用を検討したところ、Caイオンを除去した条件下ではGDNF、NTNによるRetの活性化が起こらないことが判明した。リガンドとRetの結合にはカドヘリン様構造領域が、Caイオン依存症に作用していると推定される。Hirschsprung病(HSCR)には、MEN2A型とHSCRの合併を示す家系が知られる。細胞外領域の変異により、HSCR型変異Retに細胞表面への蛋白の輸送障害が起こるが、MEN2A型とHSCRとの合併を示す家系の変異にも、Retの輸送障害が起こった。また、HSCRを合併しないとされるMEN2A型の家系の変異を解析した結果、輸送障害が起こる変異を見出した。したがって、これらの家系においてはHSCRの合併のリスクが潜在的に存在すると予想された。

Ret receptive body type, multiple endocrine syndrome (MEN) 2A ·2B, etiology of Hirschsprung disease. It is necessary to activate GDNF, Ret and GDNFR- alpha. The cell lines of the supernatant cell line were treated with Ras, GDNF, Shc, Ret, Shc, GTP, Ras, Ret, Shc, Grb2, Sos, Ras, and so on. The combination of Shc Ret and PTB analysis, the combination of MEN2a Ret Shc PTB, MEN2a PTB PTB, MEN2a PTB SH2, MEN2a, MEN2a, MEN2a Combined with the formula, Shc, MEN2A, MEN2A, and MEN2A, the possibility of pathogenicity was tested. GDNF animals are classified as "neurturin (NTN)", "Genentech", "NTN", "Ret", "active" and "bright". The activation of NTNR- α is necessary, and the complex of NTN ·NTNR-α ·Ret is active. The extracellular domain of GDNF, Ret, GDNF, NTN, Ret, GDNF, NTN, and so on, in the extracellular domain, in the extracellular domain, in In combination with the information Ret, the domain is constructed, and the effect of Ca dependence is presumed to be positive. The combination of Hirschsprung disease (HSCR) and MEN2A type HSCR showed that the pedigree had knowledge of the disease. The extracellular domain, Ret, HSCR, MEN2A, HSCR, Ret, HSCR, HSCR, MEN2A, MEN2A, HSCR, HSCR, H The results of the analysis of the results of the analysis of the results of the MEN2A pedigrees of the MEN2A family, and the transportation of the results of the analysis of the results of the analysis of the results of the MEN2A pedigrees of the MEN2A family, and the transportation and transportation of the results, the results of the analysis and the transportation of the results of the analysis of the results of the analysis of the results of the MEN2A pedigree. I don't want to know about the potential existence of the family. I don't want to know about the potential existence of the family. I don't want to HSCR the family.

项目成果

Mikinao Ohiwa et al.: "Characterization of Ret-Shc-Grb2 complex induced by GDNF,MEN 2A and MEN 2B mutations." Biochem.Biophys.Res.Commun.237. 747-751 (1997)

Mikinao Ohiwa 等人：“GDNF、MEN 2A 和 MEN 2B 突变诱导的 Ret-Shc-Grb2 复合物的表征。”

Chika Nozaki et al.: "Calcium-dependent Ret activation by GDNF and neurturin." Oncogene. 16. 293-299 (1998)

Chika Nozaki 等人：“GDNF 和 neurturin 激活钙依赖性 Ret。”

Shinji Ito et al.: "Biological properties of Ret with cysteine mutations correlate with multiple endocrine neoplasia type 2A, familial medullary carcinoma, and Hirschsprung's disease phenotype." Cancer Res.57. 2870-2872 (1997)

Shinji Ito 等人：“带有半胱氨酸突变的 Ret 的生物学特性与 2A 型多发性内分泌肿瘤、家族性髓样癌和先天性巨结肠症表型相关。”

Robert D.Klein et al.: "A GPI-linked protein that interacts with Ret to form a candidate neurturin receptor." Nature. 387. 717-721 (1997)

Robert D.Klein 等人：“一种 GPI 连接蛋白，与 Ret 相互作用形成候选神经营养因子受体。”