遺伝子改変マウスを用いた、新規アクチン結合蛋白とそのファミリーの解析

使用转基因小鼠分析新型肌动蛋白结合蛋白及其家族

• 批准号: 18657060
• 负责人: 浅井 直也
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18657060/
• 关键词: Girdin; アクチン結合蛋白; ノックアウトマウス; 血管新生; VEGF; 細胞骨格; 細胞運動; 遺伝子改変マウス; Aktキナーゼ

我々の研究室でクローニングした新規アクチン結合蛋白であるGirdinの生体における機能を個体レベルで解析する目的で、Girdin遺伝子のノックアウトマウスを作製した。ホモのマウスは、見た目に正常に生まれるが、生後3週間以内に発育の抑制と衰弱により死亡した。病態については解析中であるが、現在まで以下が判明したので報告する。各組織におけるGirdinの発現を免疫染色にて調べると幼弱な血管の内皮細胞に強い発現があったこと、血管内皮初代培養細胞であるHUVEC細胞でGirdinをノックダウンするとVEGF依存性の細胞移動能と血管網形成能が障害されたことから、血管新生にGirdinが作用しているものと考えられたので、ノックアウトマウスにおける血管の異常の有無についての解析を行った。Girdinをノックアウトしたマウスでは新生仔の血管形成に明らかな異常は認められず、胎児期の血管発生ではGirdinの作用は必須ではないと考えられた。一方、生後に発達する網膜血管および脳微小血管においては、正常マウスに比べて6〜7割程度の乏しい発育であることが分かった。また、変異マウスの血管を培養してaortic ring assayを行ったところ、VEGF依存性の血管新生能が6割程度に抑制されていた。生後の血管新生は主にVEGFに依存した現象であり、これに特異的にGirdinが重要な役割を果たしていると考えられた。癌を栄養する腫瘍血管の形成、糖尿病性網膜症などの血管増殖性疾患などでは、VEGF依存性の血管新生が病態として重要であり、Girdinの作用を抑制することで新たな治療法が開発できる可能性が考えられた。

Our laboratory has developed a new method for the analysis of Girdin's biological functions and for the production of Girdin's proteins. It is normal to have a baby, and it is weak to have a baby within 3 weeks of birth. In the analysis of the disease, the following is the report. The expression of Girdin in various tissues was modulated by immunostaining, and the expression of Girdin in vascular endothelial cells was enhanced by immunostaining. The expression of Girdin in primary cultured HUVEC cells was enhanced by VEGF-dependent cell migration. The expression of Girdin in vascular endothelial cells was enhanced by immunostaining. The analysis of abnormal blood vessels and whether they exist or not Girdin's role in neonatal angiogenesis must be examined. The omental vessels and microvessels developed after birth are usually 6 to 7 times less developed than normal. VEGF-dependent angiogenesis was inhibited to a certain extent by vascular culture. After birth, angiogenesis depends on VEGF. The role of Girdin in the pathogenesis of neoplastic vascular disease, diabetic retinopathy, and vascular proliferation is important for the development of new therapies.

项目成果

Nucleolin modulates the subcellular localization of GDNF-inducible zinc finger protein 1 and its roles in transcription and cell proliferation

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2007.07.003
• 发表时间: 2007-10-15
• 期刊: EXPERIMENTAL CELL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Dambara, Atsushi;Morinaga, Takatoshi;Takahashi, Masahide
• 通讯作者: Takahashi, Masahide

Dok-4 regulates GDNF-dependent neurite outgrowth through downstream activation of Rap1 and mitogen-activated protein kinase

• 发表时间: 2006
• 作者: 内田 真由実

An actin-binding protein girdin regulates the motility of breast cancer cells

• DOI: 10.1158/0008-5472.can-07-5111
• 发表时间: 2008-03-01
• 期刊: CANCER RESEARCH
• 影响因子: 11.2
• 作者: Jiang, Ping;Enomoto, Atsushi;Takahashi, Masahide
• 通讯作者: Takahashi, Masahide

Thermodynamic instability of siRNA duplex is a prerequisite for dependable prediction of siRNA activities.

• DOI: 10.1093/nar/gkm699
• 发表时间: 2007
• 期刊: NUCLEIC ACIDS RESEARCH
• 影响因子: 14.9
• 作者: Ichihara, Masatoshi;Murakumo, Yoshiki;Masuda, Akio;Matsuura, Toru;Asai, Naoya;Jijiwa, Mayumi;Ishida, Maki;Shinmi, Jun;Yatsuya, Hiroshi;Qiao, Shanlou;Takahashi, Masahide;Ohno, Kinji
• 通讯作者: Ohno, Kinji

Regulation of VeGF-mediated angiogenesis by the Akt/PKB substrate Girdin

• DOI: 10.1038/ncb1695
• 发表时间: 2008-03-01
• 期刊: NATURE CELL BIOLOGY
• 影响因子: 21.3
• 作者: Kitamura, Tomoya;Asai, Naoya;Takahashi, Masahide
• 通讯作者: Takahashi, Masahide