細胞内増殖機構における蛋白質リン酸化酵素PKNの機能に関する研究

蛋白激酶PKN在细胞内增殖机制中的作用研究

• 批准号: 09254239
• 负责人: 小野 功貴
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kobe University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09254239/
• 关键词: 蛋白質リン酸化酵素; PKN; 細胞内情報伝達機構

本研究においては、PKNと直接的、間接的に相互作用することによりシグナリングを制御している分子の同定を種々の方法を用いて行い、既知のシグナリング分子との関連も含めて、複雑なシグナリングネットワークの解明の一助とすることを目指した。以下に、得られた結果の概略を記す。1.PKNと相互作用する蛋白質の解析1)ビメンチンニューロフィラメントの他に、普遍的に存在する中間径フィラメントであるビメンチンともPKNが結合かつリン酸化し、重合・脱重合を制御していることから、PKNがこれら中間径フィラメントのダイナミックな動きを制御している可能性が示唆された。2)PCD17卵巣癌、子宮癌や乳癌を伴う亜急性小脳変性症(Paraneoplastic cerebellar degeneration)の自己抗体により認識される抗原としてクローニングされているPCD17が、PKNと特異的に結合することを見出した。PCD17はその一次構造上の特徴から転写因子としての機能が予測されていたが、いわゆるOne hybrid systemにより、これが転写活性制御因子であることを実験的に示唆した。このことより、PKNが核内においても何らかの機能を有することが期待された。2.PKN基質蛋白質の解析PKNの生理的機能を知る上で、その特異的基質を検索することはきわめて重要である。我々は、種々の組織抽出液よりPKNが特異的にリン酸化する蛋白質の同定を試みている。今回は、ラット肝臓よりPKN基質となりうる新規の蛋白質を精製し、そのcDNAをクローニングし解析した。本蛋白質(MIPP65)はミトコンドリアNADH ubiquinone oxidoreductase 9 KD a subunit precursorと有意な相同性を示し、動物細胞中で発現させるとミトコンドリアに局在する事が明らかとなった。

In this study, direct and direct PKN interactions are used to determine the same levels of molecular control in the same way. In this study, the direct and direct interaction methods are used to determine the same levels of molecular weight in the system. The results of the following results are briefly recorded. 1.PKN interaction protein analysis 1) in general, in the presence of small amounts of protein, it is widely known that there is no significant difference between the two groups in terms of interaction, protein analysis, protein analysis, protein analysis and protein analysis. In the PKN information system, there is an instigation of the possibility that the operation should be made available. 2) PCD17 ovary cancer, maternal cancer, breast cancer with acute microsomia (Paraneoplastic cerebellar degeneration). The antibody was used to recognize the antigen, PCD17, PKN. The PCD17 system creates a special writing factor that can be used to display the information of the active control factor, such as the active control factor, the One hybrid system system, and the active control factor. In the nuclear area of PKN, there is a lot of information on how to make sure that there is a chance that you will be able to do so. The physiological function of 2.PKN gene protein analysis of PKN is to know that it is important to understand the physiological function of PKN. Our tissue extract was tested for PKN specific acidification protein assays and the same assay was performed. This time, the liver will be affected by the PKN protein, the protein will be refined, and the cDNA protein will be analyzed. This protein (MIPP65) is intended to show homology in the NADH ubiquinone oxidoreductase 9 KD a subunit precursor. This protein is in the cell of the animal to show that it is not the same.

项目成果

Konishi, H.: "Activation of protein kinase B(Akt/RAC-protein kinase)by cellular stress and its association with heat shock protein Hsp27." FEBS Lett.410. 493-498 (1997)

Konishi, H.：“细胞应激激活蛋白激酶 B（Akt/RAC-蛋白激酶）及其与热休克蛋白 Hsp27 的关联。”

Bartsch,J.: "PKN gene(PRKCL1/Prkc11)maps to human chromosome 19p13.1 and mouse chromosome 8 with close linkage to the myodystrophy(myd)mutation." Genomics. (in press).

Bartsch, J.：“PKN 基因 (PRKCL1/Prkc11) 映射到人类染色体 19p13.1 和小鼠染色体 8，与肌营养不良 (myd) 突变密切相关。”

Matsuzawa,K.: "Domain-specific phosphorylation of vimentin and glial fibrillary acidic protein by PKN." Biochem.Biophys.Res.Commun.234. 621-625 (1997)

Matsuzawa,K.：“PKN 对波形蛋白和胶质纤维酸性蛋白进行域特异性磷酸化。”

Takanaga,H.: "PKN interacts with a paraeoplastic cerebellar degeneration-associated antigen,which is a potential transcription factor." Exp.Cell Res.(in press).

Takanaga, H.：“PKN 与癌旁小脑变性相关抗原相互作用，这是一种潜在的转录因子。”

Kitagawa, M.: "Molecular cloning and characterization of a novel mitochondrial phosphoprotein,MIPP65,from rat liver." Exp.Cell Res.235. 71-78 (1997)

Kitakawa, M.：“来自大鼠肝脏的新型线粒体磷蛋白 MIPP65 的分子克隆和表征。”