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脱皮・変態の分子機構の解析

蜕皮变态的分子机制分析

基本信息

批准号：
09265214
负责人：
上田均
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

(1)FTZ-F1遺伝子の発現制御の解析FTZ-F1遺伝子発現制御領域内のDHR3結合部位に変異を導入し、この発現制御領域とLacZ融合遺伝子を有するtransgenic fly系統を作成し、LacZ遺伝子の発現パターンを解析した。変異型融合遺伝子の発現パターンは、野生型の発現制御領域を持つ融合遺伝子の発現パターンと比べると、発現時期に違いは観察されなかったが、発現レベルが著しく低下した。このことから、DHR3は、positiveに働く因子のひとつであると考えられた。次に,FTZ-F1遺伝子転写開始点付近の様々なDNA断片とLacZ融合遺伝子を有するtransgenic fly系統を作成し、LacZ遺伝子の発現パターンを解析した。その結果、転写開始点の上流-2.4〜-0.7kbを有する融合遺伝子では、エクジソンの濃度が高い時期からの発現が観察され、-0.7〜0kbあるいは-3.7〜2.4kbにエクジソン高濃度下でnegativeに制御する領域があることが判明した。(2)FTZ-F1とそのコアクチベータ-の発現パターンの解析BmFTZ-F1と、そのコアクチベータ-であるMBF1とMBF2の抗体を用い、カイコの4齢から5齢期の絹糸腺におけるこれら3つの因子の存在量および細胞内局在を調べた。BmFTZ-F1は、4齢脱皮約半日前のスピクルステージD3からあらわれ、脱皮後速やかに消失した。MBF1の存在量に大きな変化がみられなかったが、MBF2は、4齢始めからスピラクルステージD3まで存在し、その後速やかに消失し、脱皮後再び現れた。BmFTZ-F1は、核に局在したが、MBF1とMBF2は、通常はほとんど細胞質に局在し、スピラクルステージD3の時期にのみ核に局在した。以上の結果、MBFの存在量および細胞内局在は、眼期内で時期的に制御されており、脱皮過程において何らかの意味がある可能性が示された。

(1) Analysis of FTZ-F1 gene expression control FTZ-F1 gene expression control DHR3 binding site differences in the domain of FTZ-F1 gene expression control and LacZ fusion gene expression control and transgenic fly system construction, LacZ gene expression control and analysis. The development of heteromorphic fusion gene is controlled by wild-type fusion gene. The development of heteromorphic fusion gene is controlled by wild-type fusion gene. The development of heteromorphic fusion gene is controlled by wild-type fusion gene. This is the first time I've ever seen a woman. In addition, the FTZ-F1 gene expression start point is close to the DNA fragment and LacZ fusion gene expression start point, and the DNA fragment and LacZ fusion gene expression start point are analyzed. The results showed that the fusion gene at the upstream of the writing start point was-2.4 ~-0.7kb, and the occurrence of high concentration period was observed.-0.7 0kb was observed, and-3.7 2. 4kb was observed. (2)FTZ-F1, MBF1 and MBF2 antibodies were used in the production of FZ-F1, MBF1 and MBF2 antibodies, and the presence of FZ-F1, MBF1 and MBF2 factors in the production of FZ-F1 antibodies was regulated by intracellular regulation. BmFTZ-F1, 4, peeling about half a day ago, the speed of peeling disappeared MBF1 is present in a large amount, MBF2 is present in a small amount, MBF2 is present in a small amount, BmFTZ-F1, MBF 1, MBF 2, MBF2, MBF1, MBF2, MBF2, MBF 3, MBF 4, MBF 5, MBF 6, MBF 7, MBF 8, MBF 9, MBF 9, MBF The above results indicate the possibility of MBF's existence and the control of the intracellular process during the period of dehiscence.