dBlimp-1 赋予转录抑制和转录激活潜力的作用机制-猫眼课题宝

dBlimp-1 赋予转录抑制和转录激活潜力的作用机制

批准号：

08F08420

负责人：

上田均

金额：

$1.22万

依托单位：

Okayama University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

财政年份：

2008

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2008 至 2010

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08F08420/

关键词：

Blimp-1 転写抑制相互佐用因子精製相互作用因子

项目摘要

项目成果

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昨年までにBlimp-1と相互作用する因子の同定をおこない、ヒストンH4がBlimp-1結合因子として同定することに成功した。この結果を確かめるために、Flagタグ付きのBlim-1を熱ショックコントロール下に胚の時期に発現させ、その核抽出液からBlimp-1複合体を精製した。次に精製した複合体画分をSDSポリアクリルアミドグラジエントゲル電気泳動法を用いて広い範囲で分子量による分離をおこなった後、得られたバンドの位置のタンパク質を質量分析装置で解析した。その結果、ヒストンH4由来のペプチドはその予想される分子量の位置では検出されなかったが、Blimp-1のバンドの位置にあるタンパク質を解析したところ検出された。この結果から、Blimp-1とヒストンH4は共有結合していることが示唆された。この結果をさらに確かめるために、Flagタグ付きのBlim-1を発現させたショウジョウバエ胚の核抽出液をヒストンH4抗体で免疫沈降した後にSDSポリアクリルアミドゲル電気泳動をおこない、Flagタグ抗体を用いたウエスタンブロット法でBlinp-1の検出を試みたところ、シグナルは弱いもののBlimp-1の分子量の位置にバンドが検出された。この結果から、Blimp-1とヒストンH4が結合することを示す結果が支持された。一方、Blimp-1が転写活性化のポテンシャルを与えることを確認するため、φ31インテグレースを用いたシステムでFTZ-F1プローモーターとLacZ融合遺伝子をゲノムの特定の部位に挿入し、FTZ-F1プローモーターのBlimp-1結合部位への変異導入の影響を調べた。その結果、Blimp-1の結合部位の転写活性化への関与が認められ、Blimp-1が転写活性化のポテンシャルを与える以前の結果が支持された。

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会议论文

Mechanism to determine pupation timing during prepupal period in Drosophila

果蝇预蛹期化蛹时间的确定机制

DOI： --

发表时间： 2010

期刊：

影响因子： --

作者：

[Fang Y.T., Koba K., Li J., Takeb ayashi Y., Mo J.M., Zhou G.Y., Yoh M., Fang YY., 楊宗興・磯貝ゆりか・Yunting Fang・Jiangming Mo, Hitoshi Ueda]