転写活性化のポテンシャルを与える転写抑制因子の作用機構の解析

分析提供转录激活潜力的转录抑制因子的作用机制

• 批准号: 18055023
• 负责人: 上田 均
• 金额: $ 5.44万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-18055023/
• 关键词: 転写制御; 転写抑制因子; ショウジョウバエ; Blimp-1; タイミング; エクダイソン; βFTZ-F1; 変態

ショウジョウバエBlimp-1の機能領域を詳しく調べるため、熱ショックプローモーターにBlimp-1 cDNAの様々な領域を欠失させた結合させた融合遺伝子を持つトランスジェニックフライ系統を作成し、熱ショックを与えて強制発現させ、FTZ-F1遺伝子の発現に及ぼす影響を調べた。その結果、転写抑制に必要な領域として、SETドメインのN末端側の種間で保存された領域、および、中央部のプロリンに富む領域の中央部のN末端側のニカ所を同定した。この領域はほ乳類のオルソログではその重要性が指摘されない領域で、生体を用いいた解析の重要性が示された。また、タンパクの分解を促進する領域として、中央部のプロリンに富む領域の中央部2カ所を明らかにし、分解が複数の領域によって制御されていることを示す結果を得た。一方、相互作用する因子を検索するためFlagタグのついいたBlimp-1を胚の時期に熱ショックプロモーター依存的に発現させ、Flag抗体樹脂で精製を試みた。その結果、微量ながら2種類の因子が検出され、今後スケールアップして精製および同定を試みることにした。Blimp-1の発現時期が蝋化のタイミングを決定する過程で、蝋化を誘導すると言われている蝋化直前のエクダイソンパルスのタイミングへの影響を明らかにするために、Blimp-1を熱ショックで前蛹期の中期に誘導し(蛹化のタイミングが遅延する条件)、その後の初期遺伝子E75A転写物の発現時期をRT-PCR法で調べた。その結果、Blimp-1を誘導させるとE75A転写物の増加のタイミングが遅延した。このことから、エクダイソンパルスが遅延しているために踊化のタイミングが遅延すると推定され、蝋化のタイミングを決めるパスウェイの概要が明らかになった。

シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ Blimp - 1 を の function field detailed し く adjustable べ る た め, hot シ ョ ッ ク プ ロ ー モ ー タ ー に Blimp - 1 CDNA の others 々 を owe な field loss さ せ た combining さ せ た fusion heritage 伝 son を hold つ ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ラ イ を し consummate system, thermal シ ョ ッ ク を and え て forced 発 now さ せ, but 伝 FTZ - F1 の 発 に and now ぼ す influence を adjustable べ た. そ の results, planning, inhibit に な necessary field と し て, SET ド メ イ ン の N terminal side の interspecific で save さ れ た field, お よ び, central department の プ ロ リ ン に rich む field の central department の N terminal side の ニ カ を by be し た. こ の field は ほ breast kind の オ ル ソ ロ グ で は そ の importance が blame さ れ な で い field, born body を い い た analytic importance の が shown さ れ た. ま た, タ ン パ ク の decomposition を promote す る field と し て, central department の プ ロ リ ン に rich む field の central department 2 カ を Ming ら か に し, decomposition が plural の に よ っ て suppression さ れ て い る こ と を す results indicated を た. Side, interaction す る factor を 検 cable す る た め Flag タ グ の つ い い た を embryo period の に Blimp - 1 hot シ ョ ッ ク プ ロ モ ー タ ー dependent に 発 now さ せ, Flag antibody resin で refined を try み た. そ の results, trace な が ら 2 kinds の が 検 out さ れ, future ス ケ ー ル ア ッ プ し て refined お よ び with fixed を try み る こ と に し た. Blimp - 1 の 発 period now が 蝋 change の タ イ ミ ン グ を decided す で る process, 蝋 を induced す る と said わ れ て い る 蝋 turn ahead の エ ク ダ イ ソ ン パ ル ス の タ イ ミ ン グ へ の influence を Ming ら か に す る た め に, を Blimp - 1 hot シ ョ ッ ク で pupal stage before mid の に induced し (pupation の タ イ ミ ン グ が 遅 delay す る conditions) The period of occurrence of the 伝 particle E75A転 writing <s:1> by そ RT-PCR で adjustment べた. Youdaoplaceholder0 そ results, Blimp-1を induces させるとE75A転 writing <e:1> increase <s:1> タ そ グが遅 グが遅 delay た. こ の こ と か ら, エ ク ダ イ ソ ン パ ル ス が 遅 delay し て い る た め に gave the の タ イ ミ ン グ が 遅 delay す る と presumption さ れ, 蝋 の タ イ ミ ン グ を definitely め る パ ス ウ ェ イ の profile が Ming ら か に な っ た.

项目成果

Melecular dissection of a developmental timer protein,dBlimp-1 in Drosophila.

果蝇发育定时器蛋白 dBlimp-1 的分子解剖。

• 发表时间: 2007
• 作者: Sarhan;M.;Ueda;H.
• 通讯作者: H.

Mechanism for transcriptional regulation of the Blimp-1 gene is different form that of the well-dnown early gene pattern

Blimp-1 基因的转录调控机制与众所周知的早期基因模式不同

• 发表时间: 2007
• 作者: Akagi;K.;Sarhan;M.and Ueda.
• 通讯作者: M.and Ueda.

Regulatory Mechanism of Blimp-1 Induction that Differs from The Well-known Early gene Pattern

Blimp-1 诱导的调控机制不同于众所周知的早期基因模式

• 发表时间: 2007
• 作者: Akagi;K.;Sarhan.M.;Agawa;Y.;Hirose;S.and Ueda;H.
• 通讯作者: H.

Rele of dBlimp-1 and βFTZ-F1 in the Process of Determination of Pupation Timing

dBlimp-1和βFTZ-F1在化蛹时间确定过程中的作用

• 发表时间: 2007
• 作者: Sarhan;M.;Ueda;H.
• 通讯作者: H.

Drosophila blimp-1 is a transient transcriptional repressor that controls timing of the ecdysone-induced developmental pathway

• DOI: 10.1128/mcb.01304-07
• 发表时间: 2007-12-01
• 期刊: MOLECULAR AND CELLULAR BIOLOGY
• 影响因子: 5.3
• 作者: Agawa, Yasuo;Sarhan, Moustafa;Ueda, Hitoshi
• 通讯作者: Ueda, Hitoshi