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F1-ATPaseの回転触媒機構にせまる構造解析

F1-ATPase 旋转催化机制的结构分析

基本信息

批准号：
11169242
负责人：
白木原康雄
金额：
$ 19.33万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

F1ATPase(F1:サブユニット組成α3β3γε)は、呼吸鎖が形成する膜を隔てた水素イオンの濃度差をATPに変換するATP合成酵素の膜から突き出した部分である.私たちは回転触媒機構の詳細を知る目的で、好熱菌F1・α3β3γε複合体を用いて、異なるヌクレオチド結合モードがひきおこす構造変化の詳細を調べている.今年度は、Mg-free ADPが1個だけβサブユニットに結合したF1の結晶構造と触媒機構との関連について議論した。Mgヌクレオチドを結合したβサブユニットが2個以上あるF1の従来の結晶構造との比較により、ヌクレオチド結合の変化に伴うα3β3コア部分の構造変化、γサブユニットの構造変化を特定することができた.ただしMg-freeの制約の十分な考慮が必要であった。この構造をF1の従来の結晶構造と比べると、従来の結晶構造中で活性サブユニットと思われるclosed β DPサブユニット型の構造が見られない。これが通常のmuliti-site反応に比べてunisite反応が非常に遅いことと照合している。またγサブユニットを2個ヌクレオチドを結合したβサブユニットをもつF1構造のγサブユニットと比べると、約25度ねじれていた。これは1分子計測から得られた、産物ADP Piの放出に伴う30度回転と大きさ、方向ともに合致した。Mgが存在しないため好熱菌F1は軽く阻害された状態にある。これに対応してεサブユニットがα3β3コア部分にそのヘリックス部分を差し込んでいた。

F1ATPase(F1: β3γε), respiratory lock formation membrane, separation of water element, concentration difference of ATP, conversion of ATP synthase membrane, transition of ATP synthase membrane. For the purpose of detailed understanding of the catalyst mechanism, the application of F1·α3β3γε complex of good thermal bacteria, the detailed adjustment of the structure of different combinations of different types of bacteria, and the detailed adjustment of the structure of different types of bacteria are discussed. This year, Mg-free ADP has been discussed as a combination of crystalline structure and catalytic mechanism of F1. When comparing the crystalline structures of β- It is necessary to consider the Mg-free and restrictive factors. The structure of this type is F1, and the crystalline structure of this type is F1, and the crystalline structure of this type is F1, and the crystalline structure of this type is F1, and the crystalline structure of this type is F1. This is usually the case with multi-site reactions rather than unique reactions. 2. The structure of the F1 is composed of two parts, i.e., two parts and two parts. A molecule is measured, and the product ADP Pi is released with a 30-degree rotation. Mg is present in the presence of F1. The difference between the two is that the α3β3 α 3