出芽酵母Dpb11,RFCの複製モニター機構

酿酒酵母Dpb11的复制监测机制，RFC

• 批准号: 11241205
• 负责人: 荒木 弘之
• 金额: $ 78.66万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-11241205/
• 关键词: DNA複製; モニター; チェックポイント; 細胞周期; ATM; 酵母; 複製タンパク質; タンパク質分解; Cdk; pre-RC; BRCT; 出芽酵母; 複製因子

出芽酵母Dpb11とRFC関連の因子の複製モニターにおける機能に関して、本年度は以下のような研究を行った。1.Dpb11と複合体を形成するSld2は不安定で、S期以外では量が低下する。このSld2の不安定性が、再複製抑制に関与している可能性があるので、触媒する分解系を探したが、既存のユビキチン系の中には存在しなかった。従って、新たな分解系によりSld2量が制御されている可能性がある。2.Dpb11-Sld2複合体の作用点をピンポイントで決めるため、GINS複合体、Sld3-Cdc45複合体との関連を調べたところ、これら3つの複合体はお互いに依存して複製開始領域に結合することが分かった。従って、Dpb11-Sld2が一群の複製タンパク質が複製開始領域へ結合する過程を制御していることが示唆される。3.dpb11変異株をG1で停止させ、DNA合成抑制剤であるヒドロキシ尿素存在下にリリースすると複製は開始する。その後、非許容温度下でヒドロキシ尿素からリリースすると複製や細胞分裂は野生株同様に起こるが、細胞の生存率は低下する。この原因を調べたところ、dpb11変異では野生株に比較するとダメージが高い頻度で起こっていることが分かった。従って、dpb11では複製フォークが野生株に比較すると高頻度に崩壊することによりダメージが生じ、修復されないまま細胞分裂を行うため、生存率が低下するものと思われる。4.ATMの出芽酵母ホモログであるTel1が、2本鎖DNA切断部位に組換えや修復に関与するMre11-Rad50-Xrs2依存的に結合することを明らかにした。

This year, the following studies were carried out on the replication of budding yeast Dpb11 and RFC-related factors. 1. Dpb11 complex formation is unstable in Sld2 and low in quantity outside S phase. The instability of Sld2 is related to the possibility of reproduction inhibition, the decomposition system of catalyst is explored, and the existence of existing reproduction system is discussed. The possibility of a new decomposition system is discussed. 2. Dpb11-Sld2 complex interaction point, GINS complex, Sld3-Cdc45 complex interaction point, GINS complex, Sld3-Cdc45 complex, GINS complex, G Dpb11-Sld2 is a group of replication elements that are controlled by the replication initiation domain. 3. Dpb11 mutant G1 stops, DNA synthesis inhibitors start to replicate in the presence of urea. The survival rate of replicative cells is lower than that of wild cells under different temperatures. The reason for this is that there are differences between wild plants and wild plants. Dpb11 is a high frequency of replication compared to wild plants, and the survival rate is low. 4. ATM budding yeasts can be identified by TEL1 - 2, TEL1 - 3, TEL 1 - 4, TEL 1 - 4

项目成果

Naiki T: "Chl12(Ctf18) forms a novel RFC-related complex and functions redundantly with Rad24 in the DNA replication checkpoint pathway"Molecular and Cellular Biology. 21. 5838-5845 (2001)

Naiki T：“Chl12 (Ctf18) 形成一种新型 RFC 相关复合物，并在 DNA 复制检查点途径中与 Rad24 一起发挥冗余作用”《分子和细胞生物学》。

Hiroshi Masumoto: "Dpb11 controls the association between DNA polymerase α and ε and the autonomously replication sequence region of budding yeast."Molecular and Cellular Biology. 20・8. 2809-2817 (2000)

Hiroshi Masumoto：“Dpb11 控制 DNA 聚合酶 α 和 ε 与芽殖酵母自主复制序列区域之间的关联。”分子与细胞生物学 20・8（2000）。

Nakada, D: "ATM-related Tel1 associates with double-strand breaks through an Xrs2-dependent mechanism."Genes & Development. 17. 1957-1962 (2003)

Nakada, D：“ATM 相关的 Tel1 与 Xrs2 依赖机制的双链断裂相关联。”

Kondo T: "Recruitment of Mec1 and Ddc1 checkpoint proteins to double-strand breaks through distinct mechanisms"Science. 294. 867-870 (2001)

Kondo T：“通过不同的机制将 Mec1 和 Ddc1 检查点蛋白招募到双链断裂”《科学》。

Yoichiro Kamimura: "Sld3, which interacts with Cdc45(Sld4), functions for chromosomal DNA replications in Saccharomyces cerevisiae."The EMBO Journal. (in press).

Yoichiro Kamimura：“Sld3 与 Cdc45(Sld4) 相互作用，在酿酒酵母中发挥染色体 DNA 复制的作用。”EMBO 杂志。