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出芽酵母Dpb11のDNA複製とS期チェックポイントに於ける機能

酿酒酵母 Dpb11 的 DNA 复制及其在 S 期检查点中的功能

基本信息

批准号：
10162209
负责人：
荒木弘之
金额：
$ 1.34万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1998
资助国家：
日本
起止时间：
1998 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10162209/
关键词：
染色体複製細胞周期チェックポイント複製開始酵母

项目摘要

出芽酵母の染色体DNA複製に必須なDNAポリメラーゼII(ε)(PolII)と相互作用するDPB11は、染色体DNA複製とS期チェックポイントに関与している。本年度はまずCHIP(Chromatin mmunoprecipitation)法によりDpb11,PolII,プライマーゼのクロマチンへの結合を調べた。その結果、Dpb11はPolIIとほぼ同時期に複製開始点に結合することがわかった。また、非許容条件下のdpb11-1変異株では、PolII及びプライマーゼの複製開始点への結合が起こらなかった。一方、複製開始点へM期後期から結合し、複製開始に必須な役割をしているMcmは、dpbl1-1変異株では結合したままである。これらのことは、複製酵素が複製開始点に結合する過程でDPb11が機能していることを示唆している。染色体上の複数の複製開始点はそれぞれS期の異なる時期に使われるが、ヒドロキシ尿素で複製を阻害するとS期初期に使われる開始点のみに複製酵素は結合する。しかし、S期チェックポイントに欠損を持つrad53変異では、S期後期に使われる開始点にも初期のもの同様に複製酵素が結合するため、この複製開始点活性化の制御が、S期チェックポイントコントロールの1つであると考えられている。そこで、dpbl1-1変異でPolII,プライマーゼの複製開始点への結合をヒドロキシ尿素存在下で調べると、PolIIもプライマーゼも初期及び後期の複製開始点に結合していた。これらのことは、Dpb11が複製開始点の制御に重要な働きをし、この制御を介してS期チェックポイントに関与していることを示唆するものである。

Chromosomal DNA replication in budding yeast requires DNA sequencing II(ε)(PolII) interactions with DPB11 and S phase DNA replication. This year, the CHIP(Chromatin munoprecipitation) method was used to adjust the combination of Dpb11,PolII, Dpb11 and Dpb 12. Dpb11 is the starting point of replication. Dpb11-1 under non-allowable conditions, PolII and Dpb11-1 are the starting points of replication. One side, replication start point, late M phase, combination, replication start, must be cut, dpbl1-1, heterosis, combination DPb11 is a functional process of replication initiation and replication initiation. The multiple replication start points on chromosomes are linked to replication enzymes at different stages of S phase, and replication inhibition at early S phase is linked to replication start points. In the late S phase, the replication enzymes of the same type are bound to the initial replication start point, and the replication start point is activated to control the activation of the replication enzyme. Dpbl1-1 is different from PolII, and the replication start point of PolII is different from the replication start point of PolII. Dpb11 is the starting point of replication and control.