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出芽酵母Dpb11のDNA複製とS期チェックポイントに於ける機能

酿酒酵母 Dpb11 的 DNA 复制及其在 S 期检查点中的功能

基本信息

批准号：
11143211
负责人：
荒木弘之
金额：
$ 1.22万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11143211/
关键词：
DNA複製チェックポイント DNAポリメラーゼ複製開始細胞周期

项目摘要

出芽酵母の染色体DNA複製に必要なDNAポリメラーゼε(Polε)と相互作用するDPBIIは、染色体DNA複製とS期チェックポイントに関与している。Dpb11の機能を知るため、CHIP(Chromatin Immunoprecipitation)法によりDpb11,Polε,プライマーゼのクロマチンへの結合を種々の異変株を用いて調べ、以下のことを明らかにした。1)Dpb11はPolεと複合体を作り、この複合体形成がDpb11及びPolεの複製開始領域への結合に必要である。2)Polε-Dpb11複合体が複製開始領域に結合することが、Polε-プライマーゼ複合体の複製開始領域への結合に必要である。3)複製開始には開始領域が1本鎖へとアンワインディングされ、1本鎖DNA結合タンパク質であるRPAが結合すると考えられている。RPAの変異株を用いて調べてみると、Dpb11は複製開始領域に結合しないので、複製開始領域のアンワインディングにともなって、Polε-Dpb11が複製開始領域に結合すると考えられる。4)DPB11と遺伝的に相互作用するSLD(Synthetic Lethality with dpb11-1)3は、Sld4/Cdc45と同じようにG1期からS期初期に使用される複製開始領域に結合する。従ってSld3は、Dpb11-Polε複合体が結合する以前に複製開始領域に結合し、Dpb11-Polε複合体の複製開始領域の結合に必要であることが示唆される。

It is necessary for chromosomal DNA replication in budding yeast, DNA ポリメラーゼε(Polε) and interaction するDPBIIは, chromosomal DNA replication とS phase チェックポイントにOK and している. Dpb11's functional features, CHIP (Chromatin Immunoprecipitation)法によりDpb11,Polε,プライマーゼのクロマチンへの Combined をkind 々のdifferent strain を Use いて Adjust べ, the following のことを明らかにした. 1) The Dpb11 complex is composed of Polε, and the complex formation is necessary for the combination of Dpb11 and the Polε replication start area. 2) The Polε-Dpb11 complex does not need to be combined with the replication start area, and the Polε-Dpb11 complex needs to be combined with the replication start area. 3) Copy start area start area 1 lock 1 This lock DNA is combined with the quality of the RPA and the combination of the DNA and the test. RPA's different strains are different, and Dpb11's replication start field is combined with each other, and the replication start field isのアンワインディングにともなって, Polε-Dpb11がCopy start fieldにcombinationすると考えられる. 4) The interaction between DPB11 and dpb11-1 is SLD (Synthetic Lethality with dpb11-1) 3, and Sld4/Cdc45 is the same as the G1 phase and the early phase of the S phase. Use the replication start field and combine it.従ってSld3は, the Dpb11-Polε complex is bound to the replication start area, the Dpb11-Polε complex is bound to the replication start area, and the Dpb11-Polε complex is bound to the replication start area.