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出芽酵母Dpb11のDNA複製とS期チェックポイントに於ける機能

酿酒酵母 Dpb11 的 DNA 复制及其在 S 期检查点中的功能

基本信息

批准号：
09266212
负责人：
荒木弘之
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

出芽酵母の染色体DNA複製に必須なDNAポリメラーゼII(ε)(Pol II)と相互作用するDPB11は、染色体DNA複製とS期チェックポイント機構に関与している。これまでに我々はDpb11の機能を知るため、DPB11と相互作用するSLD1-5遺伝子を遺伝学的に同定し解析している。本年度は、以下のことを明らかにした。1)Sld2とDpb11が複合体を作り、このDpb11/Sld2複合体形成が複製開始に重要である。2)Sld3はSld4(Cdc45)と遺伝的にも2ハイブリッド法でもSLD4(CDC45)と相互作用する。また、SLD3遺伝子の温度感受性変異も、cdc45変異同様に複製開始に欠損があることがわかった。Cdc45は複製開始に関与するMcmタンパク質と結合することが報告されているが、Sld3とMcm6も2ハイブリッド法では相互作用している。3)SLD5遺伝子の温度感受性変異も、複製に欠損を示した。また、sld5温度感受性変異を多コピーでサプレスするPSF1遺伝子を分離した。PSF1遺伝子は細胞の増殖に必須で、2ハイブリッド法でもSLD5と相互作用する。4)2ハイブリッド法でさらに調べると、DPB11-DPB2(Pol IIの2番目のサブユニットの遺伝子),DPB11-SLD3,DPB11-SLD5,DPB11-PSF1,DPB2-PSF1,SLD3-PSF1の間でも相互作用が認められた。これらのことから、Dpb11/Sld2,Sld5/Psf1,Sld3/Sld4がPol IIをMcm複合体にロードさせることによって、DNA合成を開始させているのではないかと考えている。

Chromosome DNA replication in budding yeast requires DNA sequencing II(ε)(Pol II) interactions between DPB11 and S phase DNA replication mechanisms. The function of DPB11 and the interaction between DPB11 and SLD1 -5 are analyzed in detail. This year, the following is the first time. 1) Sld2 Dpb11 complex 2)Sld3 to Sld4(Cdc45) to Sld 4(CDC 45) to Sld 2 to Sld4(CDC45). The temperature sensitivity of SLD3 gene is different, and the difference of cdc45 gene is different. Cdc45 is related to replication initiation and interaction between Mcm6 and Mcm6. 3) Temperature sensitivity of SLD5 gene is different, replication is insufficient. The temperature sensitivity of PSF1 is different. PSF-1 gene is essential for cell proliferation, and PSF-2 gene is essential for cell proliferation. 4)2. The interaction between DPB11-DPB2 (Pol II 2), DPB11-SLD3, DPB11-SLD5, DPB11-PSF1, DPB2-PSF1, SLD3-PSF1 is recognized. Dpb11/Sld2,Sld5/Psf1,Sld3/Sld4, Pol II, Mcm, DNA, DNA.