出芽酵母DNAポリメラーゼεとその補助因子のDNA修復における役割

酿酒酵母 DNA 聚合酶 ε 及其辅助因子在 DNA 修复中的作用

• 批准号: 09269216
• 负责人: 荒木 弘之
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09269216/
• 关键词: DNA修復; DNAポリメラーゼ; チェックポイント; DNA複製; 出芽酵母; Dpb11

出芽酵母の染色体DNA複製に必須なDNAポリメラーゼII(ε)(Pol II)と相互作用するDPB11は、染色体DNA複製とチェックポイント機構に関与している。さらに、dpb11-1温度感受性変異株は紫外線やMMSにも感受性であるが、これが修復系の欠損によるのかダメ-ジチェックポイントの欠損によるのかは分かっていない。そこでまずDpb11の機能を知るため、Dpb11と相互作用するSLD1-6遺伝子を遺伝学的に同定している。本年度は、これらSLD遺伝子について以下のことを明らかにした。1)Sld2とDpb11が複合体を作り、このDpb11/Sld2複合体形成が複製開始に重要である。2)Sld3はSld4(Cdc45)と遺伝的にも2ハイブリッド法でもSLD4(CDC45)と相互作用し、複製開始に関与する。3)SLD5遺伝子の温度感受性変異も、複製に欠損を示した。また、sld5温度感受性変異を多コピーでサプレスするPSF1遺伝子を分離した。PSF1遺伝子は細胞の増殖に必須で、2ハイブリッド法でもSLD5と相互作用する。4)2ハイブリッド法でさらに調べると、DPB11-DPB2(Pol IIの2番目のサブユニットの遺伝子),DPB11-SLD3,DPB11-SLD5,DPB11-PSF1,DPB2-PSF1,SLD3-PSF1の間でも相互作用が認められた。これらのことから、Dpb11/Sld2,Sld5/Psf1,Sld3/Sld4がPol IIを染色体にロードさせることによって、DNA合成を開始させているのではないかと考えている。5)sld6変異を相補する遺伝子として、S期及びダメ-ジチェックポイントに関与するRAD53を得、現在解析中である。

Chromosomal DNA replication in budding yeast requires DNA sequencing II(ε)(Pol II) interactions between DPB11 and chromosome DNA replication mechanisms. Dpb11-1 Temperature sensitive mutants are sensitive to UV MMS and UV light. Dpb11 functions are known and Dpb11 interacts with SLD1 -6 genes. This year, the following are the results of the survey: 1) Sld2 Dpb11 complex 2) Sld3, Sld4 (CDC45), Sld2, Sld4 (CDC45), Sld3, Sld4 (CDC45), Sld3, Sld4 (CDC45), Sld3 (CDC45), Sld4 (CDC45), Sld3 (CDC45), CDC45 (CDC4 3) Temperature sensitivity of SLD5 gene is different, replication is insufficient. The temperature sensitivity of PSF1 is different. PSF-1 gene is essential for cell proliferation, and PSF-2 gene is essential for cell proliferation. 4)2. The interaction between DPB11-DPB2 (Pol II 2), DPB11-SLD3, DPB11-SLD5, DPB11-PSF1, DPB2-PSF1, SLD3-PSF1 is recognized. Dpb11/Sld2,Sld5/Psf1,Sld3/Sld4 and Pol II chromophores were identified by DNA fusion. 5)sld6 is different from the original son, S phase and S phase, and S phase is different from RAD53.