出芽酵母DNAポリメラーゼεとその補助因子のDNA修復における役割

酿酒酵母 DNA 聚合酶 ε 及其辅助因子在 DNA 修复中的作用

• 批准号: 10165215
• 负责人: 荒木 弘之
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 1998
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1998 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-10165215/
• 关键词: ダメージチェックポイント; MMS感受性; S期チェックポイント; 酵母

出芽酵母の染色体DNA複製に必須なDNAポリメラーゼII(ε)(PolII)と相互作用するDPB11の温度感受性変異株は、染色体DNA複製とS期のチェックポイントに関与している。さらに、dpb11-1温度感受性変異株は紫外線やメチルメタンスルフォネイト(MMS)にも感受性であるが、これが修復系の欠損によるのかダメージチェックポイントの欠損によるのかは分かっていない。染色体上の複数の複製開始点はそれぞれS期の異なる時期に使われるが、ヒドロキシ尿素で複製を阻害するとS期初期に使われる開始点のみに複製酵素は結合する。しかし、S期チェックポイントに欠損を持つrad53変異は、S期後期に使われる開始点にも初期のもの同様に複製酵素が結合するため、この複製開始点活性化の制御が、S期チェックポイントコントロールの1つであると考えられている。そこで、dpb11-1変異でPolII,プライマーゼの複製開始点への結合をヒドロキシ尿素存在下で調べると、PolIIもプライマーゼも初期及び後期の複製開始点に結合していた。これらのことは、Dpb11が複製開始点の制御に重要な働きをし、この制御を介してS期チェックポイントに関与していることを示唆するものである。一方、Dpb11のDNA複製以外での機能をより明確にするため、Dpb11の新たな変異の分離を行ったところ、細胞の増殖に影響せずMMSに感受性になる変異が得られた。このことは、Dpb11の複製での機能とダメージチェックポイント及び修復での機能は分離できることを示している。

Budding yeast の chromosome DNA replication に must な DNA ポ リ メ ラ ー ゼ II (epsilon) (PolII) と interaction す る DPB11 の temperature sensitivity - different strains は, chromosome DNA replication と S period の チ ェ ッ ク ポ イ ン ト に masato and し て い る. さ ら に temperature sensitivity, dpb11-1 - different strains は ultraviolet や メ チ ル メ タ ン ス ル フ ォ ネ イ ト (MMS) に も susceptibility で あ る が, こ れ が repair is の owe loss に よ る の か ダ メ ー ジ チ ェ ッ ク ポ イ ン ト の owe loss に よ る の か は points か っ て い な い. Chromosome の plural の copy starting point は そ れ ぞ れ S period の different な に る period make わ れ る が, ヒ ド ロ キ シ urea で copy を resistance against す る と S early stage に make わ れ る starting point の み に は replication enzyme combined with す る. し か し, S phase チ ェ ッ ク ポ イ ン ト に owe loss を hold つ rad53 - different は, late S period に わ れ る に start early も の も の with others に が replication enzyme combined with す る た め, こ の copy starting point activeness の royal が, S phase チ ェ ッ ク ポ イ ン ト コ ン ト ロ ー ル の 1 つ で あ る と exam え ら れ て い る. そ こ で, dpb11-1 - different で PolII, プ ラ イ マ ー ゼ の copy starting point へ の combining を ヒ ド ロ キ シ urea in the presence of で adjustable べ る と, PolII も プ ラ イ マ ー ゼ も early and late び の copy starting point に し て い た. こ れ ら の こ と は, Dpb11 が copy starting point の suppression に important な 働 き を し, こ の suppression を interface し て S period チ ェ ッ ク ポ イ ン ト に masato and し て い る こ と を in stopping す る も の で あ る. Outside the party, Dpb11 の DNA replication で の function を よ り clear に す る た め, Dpb11 の new た な - different の separation line を っ た と こ ろ, cell の raised colonization に influence せ ず MMS に susceptibility に な る - different が must ら れ た. こ の こ と は, Dpb11 の copy で の function と ダ メ ー ジ チ ェ ッ ク ポ イ ン ト and び repair で の function は separation で き る こ と を shown し て い る.

项目成果

Leem,S-H.: "Meiotic role of SW16 in Saccharomyces cerevisiae." Nucleic Acids Research. 26(13). 3154-3158 (1998)

Leem,S-H.：“SW16 在酿酒酵母中的减数分裂作用。”

Noskov,V.N.: "The RFC2 gene,encoding the third-largest subunit of the replication factor C complex,is required for an S phase checkpoint in Saccharomyces cerevisiae." Moleculat and Cellular Biology. 18(8). 4914-4923 (1998)

Noskov,V.N.：“RFC2 基因编码复制因子 C 复合物的第三大亚基，是酿酒酵母 S 期检查点所必需的。”

Kamimura,Y.: "Sld2,which interacts with Dpb11 in Saccharomyces cerevisiae,is required for chromosomal DNA replication." Moleculat and Cellular Biology. 18(10). 6102-6109 (1998)

Kamimura, Y.：“Sld2 与酿酒酵母中的 Dpb11 相互作用，是染色体 DNA 复制所必需的。”

Sugino,A.: "DNA polymerase ε encoded by cdc20^+ is required for chromosomal DNA replication in the fission yeast Schizosaccharomyces pombe." Genes to Cells. 3(2). 99-110 (1998)

Sugino, A.：“裂殖酵母裂殖酵母中染色体 DNA 复制需要由 cdc20^+ 编码的 DNA 聚合酶。”Genes to Cells 3(2)。