活性酸素種による遺伝子発現誘導の分子基盤
活性氧诱导基因表达的分子基础
基本信息
- 批准号:12147208
- 负责人:
- 金额:$ 35.46万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2000
- 资助国家:日本
- 起止时间:2000 至 2004
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1)スーパーオキシドおよび過酸化水素それぞれの生成酵素の発現系の開発と誘導機構とスーパーオキシドセンサーの探索:前年に引き続きキサンチン脱水素酵素のモリブデン近傍の活性中心に阻害剤であるFYX-051の立体構造をX線結晶解析を進めた。また結合にともない長波吸収体を観察し、モリブデン配位子のジオメトリー決定をおこなった。これらの情報を基に基本的なモリブデン水酸化機構の反応機構の全貌を明らかにした。さらに脱水素酵素から酸化酵素への変換に関与するトリガーの最終同定と変換しないラット酵素(活性酸素非産生型)のX-線結晶構造解析、また殆どスーパーオキシドのみを産生する変異体の二つの型のX-線結晶構造を解析した。これらの情報からXDHからXO型酵素への変換機構をほぼ全貌を解明させた。これら(水酸化機構の解明、および活性酸素生成酵素への変換の分子機構の解明)は本酵素に関する永年の歴史的な課題であるが、その解明は本特定研究による大きな成果である。さらに生理的意義を解明すべき、変換させる因子の牛乳からの抽出同定をおこなった。また活性酸素の細胞化学的意義の解明をめざし細胞内での上記2つの変異酵素の発現を試みた。2)金属結合蛋白の同定:前年に引き続き、鉄結合タンパク質の検索をめざして、培養細胞を用いてポリアクリルアミドゲル二次元電気泳動で分画し、鉄結合タンパク質のデータバンク作成にむけて、既知鉄タンパク質のスポット同定を引き続き進めた。また人胎盤蛋白質の解析を試みた。3)箱嶋らと共同でおこなったHBP23の立体構造の解析結果をもとに、活性中心のCys52、Cys173およびその周辺のアミノ酸残基の変異体の解析、還元体であるチオレドキシンとの相互作用を引き続き解析し、さらにオリゴマー形成の酵素反応への影響を解析した。
1) Exploration of the development and induction mechanism of the enzyme system for the production of dehydrated water: The three-dimensional structure of FYX-051 was analyzed by X-ray crystallization in the year before last. The combination of long wavelength absorber and ligand was investigated. This information is based on the basic understanding of the water acidification mechanism and the anti-corrosion mechanism. X-ray crystal structure analysis of anhydrin enzyme, acid-producing enzyme, and X-ray crystal structure analysis of two different types of anhydrin enzyme. The information on XDH and XO enzymes and their conversion mechanisms are summarized. This paper discusses the molecular mechanism of hydrolysis mechanism and enzyme conversion of active acid. The physiological significance of this paper is explained by the fact that the milk is extracted from the milk and determined by the factor. To clarify the cytochemical significance of active acids and to explore the expression of enzymes in cells. 2)The identification of metal binding proteins: the introduction of the previous year, the identification of iron binding proteins, the use of cultured cells, the identification of two-dimensional electrokinetic analysis, the preparation of iron binding proteins, the identification of known iron binding proteins. Analysis of human placenta protein 3)The analysis results of the three-dimensional structure of HBP23, the analysis of the variant of Cys52, Cys173 and the peripheral acid residues in the active center, the analysis of the interaction between the active center and the active center, and the analysis of the influence of the enzyme reaction on the formation of the active center.
项目成果
期刊论文数量(62)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
広津晶子,阿部靖子,西野武士,箱嶋敏雄: "ペルオキシレドキシンの分子機能の構造的基盤"蛋白質・核酸・酵素. 45. 2463-2474 (2000)
Akiko Hirotsu、Yasuko Abe、Takeshi Nishino、Toshio Hakoshima:“过氧化还原蛋白分子功能的结构基础”蛋白质/核酸/酶 45。2463-2474 (2000)。
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- 发表时间:
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- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
K.Igarashi I.et al.(Nishino, T): "Kinetics of inter-domain electron transfer in flavocytochrome cellobiose dehydrogenase from the white-rot fungus Phanerochaete chrysosporium"Biochem. J. 365. 521-526 (2002)
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- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
B.T.Eger, K.Okamoto, C.Enroth, M.Sato, T.Nishino, E.F.Pai, and T.Nishino.: "Purification, crystallization and preliminary X-ray diffraction studies of xanthine Dehydrogenase and xanthine Oxidase isolated from bovine milk."Acta Cryst.. D561656-1658 (2000)
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- 作者:
- 通讯作者:
川本進, 西野朋子, 西野武士: "ゲノミクス・プロテオミクスの新展開〜生物情報の解析と応用 バキュロウイルス/昆虫細胞によるタンパク質の発現と精製"エヌ・テイ・エス(東京). (2004)
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