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小脳におけるパルス状一酸化窒素発生の分子機構

小脑脉冲一氧化氮生成的分子机制

基本信息

批准号：
09878193
负责人：
西野武士
金额：
--
依托单位：
Nippon Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09878193/
关键词：
nNOS hitric oxide sinal transduction flavoprotein Ca heme

项目摘要

NO合成酵素は分子量30万前後の2量体蛋白質であり、複数の反応中心をもつ複合金属フラビン酵素である。サブユニットあたり1つのHeme,FAD,FMN,Tetrahydrobiopterin,Calmodulinを含む。フリーラジカル産生酵素であり、複数の反応中心にそれぞれ異なる基質が反応し、反応中心間に電子伝達がおこるという性質を有している。NO合成酵素は、情報伝達の発生器として注目を集めている酵素で酵素である。本研究の今までの研究経過とその成果は以下のとおりである。小脳局在型NO合成酵素につき、その安定性に関与する新しい因子の検索を行いながらcDNA発現系による大量調整法を手がけてきた。ラット小脳よりNO合成酵素の精製は、今まで多くの研究室で試みられてきたが、酵素活性は極めて不安定であり、その活性は0℃でも1〜2時間で80%の活性を失うことが知られている。しかし我々は不安定性の原因につき検討した結果、リン脂質とCaが関与した問題であることを見い出した。Caキレート剤であるEGTAによりその活性低下は防げることが判明し、その機構としてCaにより安定化因子であるリン脂質が酵素より解離し、酵素を失活させることが判明した。安定化の主要物質はphospholipase,PE特異的結合蛋白処理でその作用が消失することおよびTLC分析、TOF-massからPhosphatidyletanolamine(PE)であることは知られた。以上の結果は、生理的には調節的な意義を予想させた。即ち、Caが単にCalmodulinを介した酵素活性化ばかりでなく、さらに高濃度(mM程度)のCaがリン脂質を酵素から離し活性を停止させるダウンレギュレーションとしても働いていることが予想された。このことはNO放出がパルス上に行われることを想定させる。

The molecular weight of NO synthesis enzyme was measured before and after molecular weight 300000, the weight of protein was measured, the center of complex protein was measured, the complex metal enzyme was synthesized, and the enzyme was purified. I don't know. I don't know if I have a Heme,FAD,FMN,Tetrahydrobiopterin,Calmodulin. In the center of the anti-virus system, the production of enzymes, the number of copies, the concentration of enzymes, the concentration of enzymes in the center, the number of enzymes in the center, and the center. NO biosynthesis enzyme, enzyme. In this study, we have reviewed the results of this study. Small local NO synthesis enzymes, stability, and new factors in the system, such as the cDNA system, a large number of methods, hand-to-hand synthesis. The NO synthetic enzyme assay was used to detect the activity of the enzyme, the activity of the enzyme Please tell me the reason why you are uneasy to determine the nature of the problem. You need to know about the results, fat, Ca, and health problems. The activity of Ca was significantly lower than that of EGTA. The stability factor was determined by Ca, the lipid enzyme was dissociated, and the enzyme was inactivated by enzyme inactivation. The binding proteins of the major compounds, phospholipase,PE-specific, disappeared. The TLC analysis was performed and the Phosphatidyletanolamine (PE)-binding proteins were identified by TOF-mass. The results of the above results, the physiological meaning of the disease is not expected to be true. That is, Ca, Ca, Calmodulin, enzyme activation, mM, Ca, lipid, enzyme, enzyme, enzyme activity, enzyme activity, Please tell me that the NO is going to let you go up the road.