权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

放射線細胞応答メカニズムと感受性予測

放射细胞反应机制及敏感性预测

基本信息

批准号：
12217029
负责人：
鈴木紀夫
金额：
$ 33.6万
依托单位：
International University of Health and Welfare (2003-2004)The University of Tokyo (2000-2002)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、感受性予測法、腫瘍増感法、正常組織防護法の開発を目指し,細胞固有の感受性に重要な因子の解明、照射後の細胞死に至るシグナル伝達経路の解明を行ってきた。MOLT4細胞を中心に、放射線感受性とくにアポトーシス様細胞死に関与する因子と経路、特に、SAPK/JNK経路とp53を介する経路の解明を進めてきた。1)従来から、注目されていたp53経路に加え、JNK経路の重要性を証明、2)MOLT4の放射線誘発アポトーシス様細胞死にはJNKの活性化に続きc-Mycの減少を伴うことを見出した。線量・時間依存的に転写因子c-mycのmRNA、タンパク量が減少し、c-myc antisense oligonucleotidesやsiRNA導入、c-Myc阻害peptides処理で、細胞死が誘導された。3)これらの現象が培養腫瘍細胞のみならずin vivo(scidマウス腫瘍系)でも起こることを検証確認した。4)DNA-PK,ATMの細胞修復シグナル系の細胞死への関与メカニズムと役割の解明;PI3-Kの阻害剤であるWortmanninはP-Aktを抑える0.1μMでは、放射線や温熱誘発細胞死に影響せず、細胞死増感には、DNA-PKとATMを抑える1μM以上の濃度とJNK経路活性化が必要で、p-Aktを抑えるだけでは十分でないことを示した。5)さらにDNA-PK欠損、p53欠損マウスと各野性系をもちいて放射線治療効果におけるこれらシグナル系の役割解明のため分割照射修復能と各臓器死の解析を行った。6)培養細胞系を中心にDNA-PK下流の照射シグナルとしてのXRCC4のリン酸化部位を決定し、リン酸化部位特異的新規抗体を作製した。さらにニワトリ白血病細胞DT-40の修復系変異株をもちいて温熱の放射線増感作用を解析した。7)新規マーカータンパクとしてp41他、XRCC4,JNKの断片化を見出した。8)これらの新規シグナルタンパクに対する特異抗体の開発作製、9)さらに開発作製した新抗体の培養細胞での検討に加え、臨床応用の共同研究を含め有用性の検討を継続してきた。以上の結果から、JNK経路を修飾して変異型又p53nullの腫瘍細胞を選択的に増感しながら野性型p53特異的に正常組織を防護できる可能性が示された。

This study aims to explore the development of sensitivity prediction, tumor enhancement and normal tissue protection methods, and to elucidate the important factors inherent in cell sensitivity, cell death after irradiation, and the pathway of cell apoptosis. MOLT4 cell center, radiation sensitivity, cell death, related factors, special, SAPK/JNK pathway, and pathway resolution 1) Proving the importance of the p53 pathway and JNK pathway, 2) Radiation-induced apoptosis of MOLT4 and cell death, JNK activation and c-Myc reduction. Line quantity and time-dependent gene expression factor c-myc mRNA and protein quantity decrease, c-myc antisense oligonucleotides and siRNA introduction, c-Myc inhibitor peptides treatment, cell death induction. 3) The phenomenon of cell culture in vivo(scid) was confirmed. 4)DNA-PK,ATM cell repair related to cell death and cell cleavage;PI3-K inhibitor Wortmannin P-Akt inhibition 0.1μM, radiation and thermo-induced cell death, cell death, DNA-PK, ATM inhibition 1μM or more JNK pathway activation necessary, p-Akt inhibition 0.1 μM. 5) DNA-PK deficiency, p53 deficiency, and analysis of radiation therapy effects in each wild system. 6)In cultured cell lines, the central DNA-PK stream was irradiated to determine the acidification site of XRCC4, and novel antibodies specific to the acidification site were produced. The analysis of the radiosensitivity of HT-40 leukemic cells to heat and radiation. 7)The new rules are shown in p41, XRCC4 and JNK fragments. 8) Development of specific antibodies for these novel antibodies, 9) Development of novel antibodies, evaluation of cultured cells, and joint research for clinical applications, including evaluation of usefulness. The above results indicate that JNK pathway modification and p53null tumor cell selection may increase sensitivity and protection to wild-type p53-specific normal tissues.