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神経特異的スプライシング因子、NSSRの機能解析と遺伝子破壊マウスの表現型解析

神经元特异性剪接因子、NSSR 的功能分析以及基因破坏小鼠的表型分析

基本信息

批准号：
13035061
负责人：
塚原俊文
金额：
$ 3.84万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

神経で発現する遺伝子の多くが選択的スプライシングによってその機能が調節される。神経でのスプライシング制御機構を明らかにするため、マウス脳より神経特異的に発現するスプライシング因子を検索し、新規SRタンパク質、NSSR1および2を単離した。これら二種のタンパク質は同一ゲノムから選択的スプライシングによって生成されるが、NSSR1はGluR2遺伝子exon 14のskippingに抑制的に、一方、NSSR2は促進的に働く事が明らかとなった。NSSRタンパク質の機能をより詳細に解析するため、酵母two-hybrid系によるscreeningを行った。NSSR2にはTra2βあるいはSRP30cが結合した。COS細胞を用いたpull-down assayでも共沈する事が示された。また、spliceosomeの構成因子であるU1-70Kタンパク質とも結合する事が明らかとなった。従って、NSSRタンパク質はこれらタンパク質と供にspliceosomeを構成し、機能していると推定された。スプライシング因子はこれまで互いにSR部位で結合していると考えられてきた。しかし、NSSR2ではSR部位がtruncateされて不完全であるため、他の部位が互いの結合に関与している事が示唆された。RNA結合部位を他のRNA結合配列に交換しても、NSSR1は神経特異的スプライシングを促進し、逆にNSSR2は抑制する事も明らかとなり、スプライシングの制御はSR部位を含むC末端側によって行われていると推定された。NSSRは網膜や嗅組織での発現が多く認められることから、感覚神経におけるスプライシングへの関与が強く示唆される。さらに、生理的機能を調べる目的で遺伝子破壊マウスを作成した。Nullマウスは一見正常であり、外見上の差異は認められなかった。感覚器官を中心により詳細な行動解析が必要であり、今後の課題となった。

The god can see that the selected sub-system is capable of reducing the number of passengers. The information system is used to determine the information of the system, the information system, the special information system, the new SR system, and the NSSR1 information system. This is not the case in which you have selected the same information in the same way. You have the following information: NSSR1, GluR2, sub-exon 14, skipping suppression, one party, NSSR2 promotion, and so on. The NSSR system can be used to analyze the screening of yeast two-hybrid. NSSR2, Tra2, β, SRP30c, and so on. The COS cell shows the truth by using the word "pull-down assay" to co-sink. The combination of factors such as U1-70K, spliceosome and so on can be used in combination with the information of the situation. It is necessary to determine whether or not the spliceosome is due to be established, and that the spliceosome is presumed to be presumed to be valid. This is the first time that the SR parts of each other have been combined with each other. The SR parts of NSSR2 and SR are not completely affected. The other parts of the body are combined with each other and the other parts are instigated by the accident. The combination of the RNA and other parts of the RNA is combined with the combination of the communication device, the NSSR1 special device, the anti-NSSR2, the anti-NSSR2, the control and the control of the SR, which contains the C-terminal terminal anti-interference effect. The NSSR network sniffer organization is aware of multiple information, awareness, response, and instigation. The purpose of this study is to make a success of the disease, the physiological function and the physiological function. As soon as you see a normal person and an outsider, you may have a problem with Null. The sensory organ center is responsible for the analysis of the necessary activities, and the future problems will be discussed.