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神経特異的に発現する新規SRタンパク質、NSSR1および2の機能と生理的役割

神经元中特异表达的新型 SR 蛋白 NSSR1 和 2 的功能和生理作用

基本信息

批准号：
11155225
负责人：
塚原俊文
金额：
$ 1.28万
依托单位：
National Center of Neurology and Psychiatry
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

神経特異的スプライシング機構の解明を目的として、神経に高い発現がみられる新規SRタンパク質NSSR1および2遺伝子を単離した。NSSR1と2は共に核内にスペックル状に存在し、またin vitroおよびin vivoでスプライシング活性を有することから新規のスプライシング因子であると推定された。これら遺伝子は脳と睾丸に多く発現しているが他の臓器にはほとんど発現がみられず、また神経やグリアへの分化が可能なP19細胞の系で調べたところNSSR2には恒常的な発現が見られたがNSSR1は神経細胞でのみで発現していた。さらに詳細な発現部位を調べるため、in situ発現解析を行って確かめたところNSSR1、2のいずれも神経系、特に視神経に多く発現していることが示された。この結果はNSSR1および2の生理的機能が視神経でのスプライジングの制御機構に関与していることを示唆している。次にNSSR遺伝子の発現調節機構解明のため、ゲノム遺伝子の構造の解析を行った。その相同性等の知見より、NSSR1と2は同一ゲノム遺伝子由来であると推定されたが、FISH解析の結果、本遺伝子はマウス染色体の4qD3のみにシグナルが見られ、単一の遺伝子であることが強く示唆された。また、NSSR1遺伝子ORFのすべてが一つのexonより成ることが明らかとなった。最近、本遺伝子のカウンターパートと考えられる遺伝子がArabidopsisからも発見されており、本遺伝子は進化上でよく保存されていると考えられた。塩基配列を解析した結果、本遺伝子上流にはc-myb結合部位が7つ存在していた。CAT遺伝子の上流にNSSRゲノム断片を挿入して反応を確かめたところ、c-mybのtransfectionによってCAT活性の上昇が見られ、NSSR遺伝子の発現調節にc-mybが関与していることが示された。

The new regulations on neuro-specific neuroscience and neuroscience include NSSR1 and NSSR 2. NSSR1 and NSSR2 are both present in the nucleus and presumed to be active in vivo. In addition, the P19 cell line was regulated by the NSSR2, and the NSSR1 cell line was regulated by the NSSR2. In addition, NSSR1, 2 and NSSR 2 are included in the internal system, and the internal system is included in the internal system. The results show that the physiological function of NSSR1 and 2 is related to the control mechanism of the nervous system. NSSR gene expression regulation mechanism analysis, analysis of NSSR gene structure NSSR1 and 2 are identical to each other. The origin of the gene is presumed. FISH analysis results show that the gene is identical to the chromosome 4qD3. The gene is identical to each other. NSSR1 gene ORF's Recently, the original text of the original text of the text of the text. As a result of base alignment analysis, there are 7 c-myb binding sites in the upstream of this gene. CAT gene up-stream NSSR gene fragments are detected by PCR, c-myb gene transfection is detected by CAT activity up-stream, c-myb gene expression is detected by PCR, and c-myb gene expression is detected by PCR.