末梢B細胞におけるV(D)J遺伝子再構成の高親和性抗体レパトア形成への寄与

V(D)J 基因重排对外周 B 细胞高亲和力抗体库形成的贡献

• 批准号: 13037024
• 负责人: 大森 斉
• 金额: $ 2.94万
• 依托单位: Okayama University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13037024/
• 关键词: 抗体; 遺伝子再構成; 体細胞変異; 胚中心; クローン選択; トランスジェニックマウス; 抗原レセプター; 親和性成熟; 成熟B細胞; RAG遺伝子; V(D)J再編成; インターロイキン7

B細胞レパトアの限定されたマウスを用いて、抗体の親和性成熟機構を解析した。抗体の親和性成熟は、胚中心内で起こる高頻度の体細胞変異によるB細胞の多様化と、高親和性クローンの正の選択により起こるとされている。方、我々は免疫したマウスのリンパ節B細胞においてRAG-1,RAG-2の発現が上昇し、末梢でV(D)J再構成(receptor revision)が起こることを見出し、その生理的意義を追求してきた。本研究において、B細胞レパトアの限定されたNP特異的VH遺伝子ノックインマウス(QBF1)を用いてreceptor revisionが抗体の親和性成熟に寄与しているか否か、について検討した。NPよりも低親和性のハプテンであるpNPで免疫したところ、高親和性抗pNPIgGが誘導され、その大部分はλ鎖を有していた。このλ鎖陽性抗体はリンパ節内で起こった新たなλ鎖の再構成に依存して生成したことが以下の結果より強く示唆される。1)λ鎖陽性B細胞を除去したQBF1脾臓細胞をRAG-1(-/-)マウスに移入した系で、pNP免疫後、脾臓B細胞でRAG発現が上昇し、λ鎖組換えの中間体であるJλ1-RSS breakが検出される。2)MG発現を抑制すると、λ鎖陽性抗体の産生が減少し、抗pNPIgGの親和性が低下する。これらの結果は、末梢で免疫後にL鎖のreceptor revisionが起こり、高親和性λ鎖陽性クローンの生成に寄与し得ることを示している。

B cell affinity maturation mechanism analysis Antibody affinity maturation, high frequency of somatic differentiation, B cell diversification, high affinity maturation, positive selection, initiation, and differentiation in the embryonic center The expression of RAG-1 and RAG-2 in B cells increased, and receptor revision in V(D)J began. In this study, the affinity maturation of antibodies was determined by using receptor revision for NP-specific VH gene (QBF1). NPs with low affinity and high affinity were induced by pNP IgG. The positive antibody of λ-lock was generated in the segment, and the new λ-lock was reconstructed. 1) RAG-1(-/-) was detected in QBF1 spleen cells after λ-lock positive B cells were removed and RAG-1(-/-) was detected in pNP immunized spleen B cells. 2)MG production was inhibited, λ-lock positive antibody production decreased, and anti-pNP IgG affinity decreased. The result is that the receptor revision of L lock after terminal immunity is initiated, and the receptor revision of high affinity λ lock positive gene is generated.

项目成果

Kanayama, N.: "Use of secondarily revised VH genes in IgE antibodies produced in mice infected with nematode Nippostrongyrus brasiliensis"Immunol. Lett.. 77巻2号. 181-186 (2001)

Kanayama, N.：“在感染巴西尼波圆线虫的小鼠中产生的 IgE 抗体中使用二次修订的 VH 基因”，《免疫学杂志》，第 77 卷，第 2. 181-186 期（2001 年）。

Kanayama, N.: "B cell selection and affinity maturation during an antibody response in the mouse with limited B cell diversity"J. Immunol.. 169巻24号. 6865-6874 (2002)

Kanayama, N.：“B 细胞多样性有限的小鼠抗体反应过程中的 B 细胞选择和亲和力成熟”J.Immunol.. Vol. 169，No. 24. 6865-6874 (2002)

Magari, M.: "Contribution of light chain rearrangement in peripheral B cells to the generation of high-affinity antibodies"Eur. J. Immunol.. 32巻(印刷中). (2002)

Magari, M.：“外周 B 细胞中轻链重排对高亲和力抗体生成的贡献”Eur. J.Immunol.. 第 32 卷（出版中）。

Magari, M.: "Contribution of L chain rearrangement in peripheral B cells to the generation of high-affinity antibodies"Eur. J. Immunol.. 32巻3号. 956-966 (2002)

Magari，M.：“外周 B 细胞中 L 链重排对高亲和力抗体生成的贡献”Eur. J.Immunol.. Vol. 32，No. 3. 956-966 (2002)

Ohmori, H.: "Role for complement receptors (CD21/CD35) in the regulation of recombination activating gene expression in murine peripheral B cells"Immunol. Lett.. 83巻4号. 95-99 (2002)

Ohmori, H.：“补体受体 (CD21/CD35) 在调节小鼠外周 B 细胞重组激活基因表达中的作用”《Immunol》，第 83 卷，第 4. 95-99 期 (2002)