核膜を識別する核内共生細菌ホロスポラのプロテオーム解析と特殊機能の応用開発

识别核膜的内共生细菌Holospora的蛋白质组分析及特殊功能的应用开发

• 批准号: 14014237
• 负责人: 藤島 政博
• 金额: $ 3.14万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14014237/
• 关键词: 核内共生細菌; ホロスポラ; ゾウリムシ; プロテオーム解析

1)感染型ホロスポラ・オブツサの片方の末端に存在する標的核膜貫通部位に特異的なモノクローナル抗体の作成に成功した。間接蛍光抗体法では、標的核膜貫通部位の内部構造に抗原が存在することが明らかになった。抗原を2D-SDS-PAGEゲルから精製し、部分アミノ酸配列を解析し、解読済ゲノムからそのORFの検出を試みたが解読済の65%にはORFが存在しなかった。したがって、残り35%のゲノムに存在するか、または宿主から輸入されたものである可能性がある。核膜貫通機能を持つタンパク質の可能性を予測して、生活環での抗原の出現時期と感染過程での抗原の運命を、イムノブロットと免疫電顕で調べている。2)国内で採取されたミドリゾウリムシ(Paramecium bursaria)から新種のホロスポラを発見した。このホロスポラは大核特異的で、形態はHolospora bacillataに似ているが、宿主特異性及び、ホロスポラ属を2グループに分ける16S rRNAのプローブを用いたin situ hybidizationで、新種と判定された。3)ホロスポラ・オブツサの増殖型の細胞外膜特異的抗原が、ホロスポラが感染型に分化するときに、いつ消失するかを間接蛍光抗体法で明らかにした。この抗原は宿主クロマチンと接着する性質をもち、これによって増殖型は宿主の娘核に分配されることを保証される。一方、感染型にはこの抗原がないため、核分裂時に娘核には分配されず、核膜に包まれて細胞質に放出され、細胞肛門から宿主外に出される。これによって、感染型は他の宿主に感染する機会を得ている。

1)Successful preparation of antibodies specific to the target nuclear membrane penetration site at the end of the infectious type Indirect light antibody method is used to detect the presence of antigen in the internal structure of the target nuclear membrane penetration site. Antigen 2D-SDS-PAGE must be purified, partially digested, and 65% of ORFs are still present. 35% of the time, there is a possibility that the host will not be able to enter. To predict the possibility of nuclear membrane penetration, to predict the time of antigen appearance, to predict the fate of antigen during infection, to predict the time of antigen appearance and to modulate the immune response. 2)In China, the new species of Paramecium bursaria was introduced. The main characters of holospora bacillata are Holospora bacillata, Holospora bacillata and holospora bacillata. 3) Antigens specific to the cell outer membrane of the reproductive type are identified by indirect light antibody method. This antigen is the host gene and the next gene is the host gene. One side, infection type, antigen distribution, nuclear division, cytoplasmic release, cell anal release The infection type and the host infection opportunity are obtained.

项目成果

M Hori, M.Fujishima: "Influence of the endosymbiotic bacterium Holospora obtusa against heat-shock Resistance of the host Paramecium"J. Enkariotic Microbiol.. (In press). (2003)

M Hori，M.Fujishima：“内共生细菌 Holospora obtusa 对宿主草履虫热激抗性的影响”J。

M.Fujishima, M.Kawai: "Endonuclear symbiotic bacteria Holospora species distinguish nuclear envelopes of macro-and micronucle of the host Paramecium, ICES Proceedings"名古屋大学出版会(In press). (2003)

M.Fujishima，M.Kawai：“内核共生细菌 Holospora 物种区分宿主草履虫的大核和微核的核膜，ICES 论文集”名古屋大学出版社（2003 年）。