プロテインキナーゼAuroraによる染色体均等分離の制御機構とがん治療への応用

蛋白激酶Aurora对染色体同质分离的控制机制及其在癌症治疗中的应用

• 批准号: 14026020
• 负责人: 浦野 健
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14026020/
• 关键词: リン酸化酵素; 細胞分裂; 分子標的; がん; 脱リン酸化酵素; タンパク質分解; 染色体リモデリング複合体; イメージング技術

1.Auroraのリン酸化コンセンサス配列を決定した。ヒストンH3の28番目のセリンもAuroraによりリン酸化されることを証明した。またAuroraの自己リン酸化部位を同定し,リン酸化モノクローナル抗体を作製し細胞内においても自己リン酸化部位が生理的にリン酸化されることを確認した。2.Auroraはオカダ酸感受性のフォスファターゼにより不活性化される機構を解明した。3.Aurora-Aのタンパク質分解機構として,APC (anaphase-promoting complex)の活性化タンパク質であるCdh1/Hct1に依存してユビキチン化され分解を受けることを証明した。4.Auroraファミリーすべてを認識するモノクローナル抗体を作製した。5.染色体リモデリング複合体であるNuRDのサブユニットであるMBD3は細胞分裂中期においてリン酸化を受け,in vitroにおいてMBD3はAurora-Aによりリン酸化されることを証明した。6.蛍光蛋白質との融合蛋白質としてAurora-A,ヒストンH3,Importin αを発現する細胞株を樹立した。生きたままの状態でAurora-Aの分子レベルの挙動を,最新のタイムラプスイメージング技術により詳細に検討を加えた。7.開発したアンチセンスDNA法によりヒトがん細胞から特異的にAurora-Aを消去すると,染色体の赤道面への整列が不完全となり細胞周期が分裂前中期において停止することを見出した。ヒトAurora-Aは,様々ながん細胞においてDNA増幅や蛋白質の発現増強が高率に認められている。この研究により,Aurora-Aはがん治療の新しい分子標的となり得ることが判明した。

1.Aurora セ リ <s:1> acidification コ セ セ サス サス allocation を determines た た. Youdaoplaceholder0 セリ H3 <s:1> 28 subdivision セリ セリ <e:1> Auroraによ リ リ リ acidification される とを とを proof た た. を ま た Aurora の himself リ ン acidification parts with し, リ ン acidification モ ノ ク ロ ー ナ ル し cells within the antibody を cropping に お い て も himself リ ン acidizing が physiological に リ ン acidification さ れ る こ と を confirm し た. 2.Aurora ゼによ カダ acid sensitivity カダ フォスファタ ゼによ ゼによ inactivation される institutions を explain た た. 3. Aurora - A の タ ン パ ク qualitative decomposition institutions と し て, APC (anaphase - promoting complex) の activeness タ ン パ ク qualitative で あ る Cdh1 / Hct1 に dependent し て ユ ビ キ チ ン change さ を れ decomposition by け る こ と を prove し た. 4.Auroraファ リ リ すべてを すべてを Understanding するモノ ロ ロ ナ ナ を production of を antibodies た making of た. 5. The chromosome リ モ デ リ ン グ complex で あ る NuRD の サ ブ ユ ニ ッ ト で あ る MBD3 は mid cells divide に お い て リ ン acidification を け, the in vitro に お い て MBD3 は Aurora - A に よ り リ ン acidification さ れ る こ と を prove し た. 6. 蛍 light protein と の fusion protein と し て Aurora - A, ヒ ス ト ン H3, Importin alpha を 発 now す る cell lines を set し た. State of raw き た ま ま の で Aurora - A の molecular レ ベ ル の 挙 を, latest の タ イ ム ラ プ ス イ メ ー ジ ン グ technology に よ り detailed に を 検 please add え た. 7. Open 発 し た ア ン チ セ ン ス DNA method に よ り ヒ ト が ん cells か ら specific に Aurora - A を elimination す る と, chromosome の equatorial plane へ の whole column が incomplete と な り cell cycle が divided middle に お い て stop す る こ と を shows し た. ヒ ト Aurora - A は, others 々 な が ん cells に お い て DNA of rights や protein の 発 now raised strong が high rate に recognize め ら れ て い る. <s:1> <s:1> research on によ によ,Aurora-A がん がん for the treatment of <s:1> new <s:1> molecular target とな とな る とが とが determine た た.

项目成果

Sugiyama, K.: "Aurora-B associated protein phosphatases as negative regulators of kinase activation"Oncogene. 21. 3103-3111 (2002)

Sugiyama, K.：“Aurora-B 相关蛋白磷酸酶作为激酶激活的负调节因子”癌基因。

Sakai, H.: "MBD3 and HDAC1, two components of the NuRD complex, are localized at Aurora-A-positive centrosomes in M phase"J Biol Chem.. 277. 48714-48723 (2002)

Sakai, H.：“MBD3 和 HDAC1，NuRD 复合物的两个组成部分，位于 M 期的 Aurora-A 阳性中心体”J Biol Chem.. 277. 48714-48723 (2002)

Mitsuhashi, S.: "Usage of tautomycetin, a novel inhibitor of protein phosphatase 1 (PP1), reveals that PP1 is a positive regulator of Raf-1 in vivo"J Biol Chem.. 278. 82-88 (2003)

Mitsuhashi, S.：“蛋白磷酸酶 1 (PP1) 的新型抑制剂互变霉素的使用表明 PP1 是体内 Raf-1 的正调节因子”J Biol Chem.. 278. 82-88 (2003)

Chen, H.H.: "Suppression of lung metastasis of mouse Lewis lung cancer P29 with transfection of the ganglioside GM2/GD2 synthase gene"Int J Cancer. 103. 169-176 (2003)

Chen, H.H.：“通过转染神经节苷脂 GM2/GD2 合酶基因抑制小鼠 Lewis 肺癌 P29 的肺转移”Int J Cancer。

Nakamura, Y.: "Identification of a Drosophila gene encoding xylosylprotein β4-galactosyltransferase that is essential for the synthesis of glycosaminoglycans and for morphogenesis"J Biol Chem.. 277. 46280-46288 (2002)

Nakamura, Y.：“编码木糖基蛋白 β4-半乳糖基转移酶的果蝇基因的鉴定，该酶对于糖胺聚糖的合成和形态发生至关重要”J Biol Chem.. 277. 46280-46288 (2002)