G2/M期を制御するプロテインキナーゼAuroraの細胞内情報伝達機構

控制G2/M期的蛋白激酶Aurora的细胞内信号转导机制

• 批准号: 12213055
• 负责人: 浦野 健
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213055/
• 关键词: 細胞周期; Aurora2; 造腫瘍能; 蛋白質分解; APC; アンチセンスオリゴDNA; 中心体; 染色体

G2/M期におけるチェックポイント制御機構の破綻は,がん,特に悪性化の特徴の一つでもある染色体不安定性や細胞分裂の異常をひき起こす。ヒトAurora2は,染色体分離の重要な調節因子として酵母やショウジョウバエにおいて同定された遺伝子のヒトホモローグとして単離されたセリン/スレオニンキナーゼである。ヒトAurora2は,大腸がんや乳がんなど様々ながん細胞においてDNA増幅や蛋白質の発現増強が認めれており,また造腫瘍能を有することが知られている。Aurora2蛋白質の分解について:Aurora2蛋白質に対するモノクローナル抗体の作製に成功し,この抗体を用いてAurora2蛋白質は,G2/M期に特異的に発現し,その後急速に分解されることを確認した。その局在は,中心体および紡錘体極であった。G2/M期終了後速やかにおこるAurora2蛋白質の分解がAPC-ユビキチン-プロテアソーム系によることを生化学的および分子生物学的手法を用いて解明した。アンチセンスオリゴDNAを用いた解析について:1)Aurora蛋白質すべてを認識するモノクローナル抗体の作製に成功し,この抗体を用いてアンチセンスオリゴDNAのスクリーニングを行った。Aurora1およびAurora3に影響を与えずAurora2のみを選択的に細胞から消去する方法を開発した。2)このアンチセンスオリゴDNAを癌細胞に投与することによりAurora2蛋白質を特異的に消失させると細胞はM期早期において停止した。3)さらに中心体および染色体の状態を観察すると,中心体の分離が不十分であり,一部中心体が分離できた細胞においても明らかな染色体の不均等分離が認められた。つまり,Aurora2はヒト細胞においても中心体および染色体の均等分離に直接関与し,G2/M期早期の進行を制御していることがはじめて確認された。

G2/M phase is characterized by chromosomal instability and abnormal cell division. Aurora2 is an important regulatory factor for chromosome segregation. It is also an important regulatory factor for chromosome segregation. Aurora2 is a large intestine that increases DNA amplitude and protein production in cells, and it can be used to produce tumors. Aurora2 protein breakdown:Aurora2 protein was successfully produced for the G2/M phase specific antibody, and rapid breakdown was confirmed. The central body is the spindle pole. The breakdown of Aurora2 protein after the end of G2/M phase is explained by APC-related biological methods. The analysis of Aurora protein and DNA was carried out successfully. Aurora1 and Aurora3 are affected by Aurora2 and selected cells are eliminated. 2) The Aurora2 protein specifically disappears in the early stages of the cell cycle. 3) Centrosome segregation is not very clear when chromosome segregation is detected. Aurora2 is directly related to centrosome segregation and chromosome segregation, and early G2/M phase is controlled.

项目成果

Honda, K.: "Degradation of human Aurora2 protein kinase by the anaphase-promoting complex-ubiquitin-proteasome pathway"Oncogene. 19. 2812-2819 (2000)

Honda, K.：“后期促进复合物-泛素-蛋白酶体途径对人 Aurora2 蛋白激酶的降解”癌基因。

Okajima,T.: "Expression cloning of human globoside synthase cDNAs : Identification of β 3Gal-T3 as UDP-N-acetylgalactosamine : globotriaosylceramide β1, 3-N-acetyl-galactosaminyltransferase."J.Biol.Chem.. 275. 37752-37756 (2000)

Okajima, T.：“人球苷脂合酶 cDNA 的表达克隆：将 β 3Gal-T3 鉴定为 UDP-N-乙酰半乳糖胺：globotriaosylceramide β1, 3-N-乙酰基半乳糖胺基转移酶。J.Biol.Chem.. 275. 37752-” 37756 (2000)

Fukumoto, S.: "GD3 synthase Gene Expression in PC12 Cells Results in the Continuous Activation of TrkA and ERK1/2 and Enhanced Proliferation"J. Biol. Chem.. 275. 5832-5838 (2000)

Fukumoto, S.：“PC12 细胞中的 GD3 合酶基因表达导致 TrkA 和 ERK1/2 持续激活并增强增殖”J.

Okajima, T.: "Molecular cloning and expression of mouse GD1α/GT1aα/GQ1bα synthase (ST6GalNAc VI) gene"J. Biol. Chem.. 275. 6717-6723 (2000)

Okajima, T.：“小鼠 GD1α/GT1aα/GQ1bα 合酶 (ST6GalNAc VI) 基因的分子克隆和表达”J. Biol. 275. 6717-6723 (2000)

Furukawa,K.: "Molecular basis for the p phenotype : Identification of distinct and multiple mutations in the α1, 4-galactosyltransferase gene in Swedish and Japanese individuals."J.Biol.Chem.. 275. 37752-37756 (2000)

Furukawa, K.：“p 表型的分子基础：瑞典和日本个体中 α1, 4-半乳糖基转移酶基因的独特和多重突变的鉴定。J.Biol.Chem.. 275. 37752-37756 (2000)